新生儿溶血病检测操作 SOP一、产前诊断1、夫妇血型检测(微柱凝胶检测法:ABO、Rh(D)血型定型检测卡)1、1 将红细胞稀释至 1% 红细胞生理盐水悬液;1、2 撕开微胶卡得封膜,于正定管蓝 A、黄 B、灰 D、Control 微柱管反应腔中加入 1% 待检 RBC 生理盐水悬液各 50μl;于反定管白色 A、B、O、自身管分别对应加入 1、0% A1、B、O 型试剂红细胞与待检红细胞生理盐水悬液 50μl,再分别加入待检血浆(血清)50μl;1、3 将检测卡室温反应≥10 min,取出,置离心机 1000r/min 2min,1800r/min 3 min 离心;1、4 取出,判定结果(凝集强度推断详见结果判定示图)。按下表检验结果判定 ABO、RhD 血型:检验结果ABO、RhD 血型判定兰 A黄 B灰 DControl(待检 RBC)A1BOControl(血浆与自身 RBC)+-+或---+--A 型 RhD(+或-)-++或--+---B 型 RhD(+或-)--+或--++--O 型 RhD(+或-)+++或------AB 型 RhD(+或-)2、孕妇抗体效价得测定(微柱凝胶检测法:抗人球蛋白检测卡)2、1 孕妇 IgG(抗 A/抗 B)效价2、1、1 取待检血清与 2-Me(二巯基乙醇)应用液各 0、2ml,充分混匀,37℃水浴 2 小时(以充分破坏血清中得 IgM 类抗体)。 2、1、2 取 4 支洁净试管排于试管架上;将第一管加入 50 微升中与血清与 1、6 毫升低离子介质(原液为 1:1 稀释,此时稀释倍数为原液得 64 倍)。2、1、3 第 2-4 管中分别加入 400 微升低离子介质;从第一管中吸出 400 微升得液体加入第二管,混匀,在从第二管吸出 400 微升加入第三管混匀,依次倍比稀释。2、1、4 取抗人球蛋白检测卡,撕去铝箔,在 4 管中个依次加入倍比稀释好得灭活血清 50微升与 1%得标准红细胞(或父亲红细胞)低离子介质(LIM)悬液 50 微升。2、1、5 将加好样得检测卡入生科孵育器中孵育 15 分钟。2、1、6 将孵育好得检测卡放入生科离心机中离心 5 分钟(1000r/min 2 min,1800r/min 3 min),(离心必须在加样后 30 分钟内进行)2、1、7 取出,判定结果(凝集强度推断详见结果判定示图)临床参考值:孕妇 IgG(抗 A/抗 B)效价≤64。2、2 孕妇 IgG(抗 D)效价测定2、2、1 确定孕妇为 RhD 阴性,丈夫为 RhD 阳性。2、2、2 取待检血清与 2-Me(二巯基乙醇)应用液各 0、2ml,充分混匀,37℃水浴 2 小时(孕妇血清与 O 型 RhD 阳性红细胞反应盐水法为阳性需要灭活,阴性不需要灭活)。 2、2...