细菌鉴定中常用的生理生化反应生 72 伍国羽 2025012357组别 周四班 2-1-1实验同组人：王甦实验时间 2025 年 4 月 23 日实验目的1)了解细菌生理生化反应原理，掌握细菌鉴定中常用的生理生化反应的测定方法；2)通过不同细菌对不同含碳、含氮化合物的分解利用情况，了解细菌碳、氮代谢类型的多样性；3)了解细菌在培育基中的生长现象及其代谢产物在鉴别细菌中的意义；4)学习各种接种技术。实验原理各种细菌所具有的酶系统不尽相同，对营养基质的分解能力也不一样，因而代谢产物存在差别。细菌的这种代谢特点可供鉴别细菌之用。用生理生化试验的方法检测细菌对各种基质的代谢作用及其代谢产物，从而鉴别细菌的种属，称之为细菌的生理生化反应。实验仪器,材料和用具实验仪器：恒温培育箱。微生物材料：大肠杆菌、变形杆菌、枯草杆菌、产气杆菌和未知菌种的平板各 1 个。试剂：甲基红试剂、V.P.试剂、吲哚试剂实验用具：试管：每个试验４根试管(３根接种，1 根对比) 。接种环、接种针、酒精灯、试管架、记号笔。实验步骤1. 配置培育基1） 葡萄糖/乳糖发酵培育基（用于葡萄糖发酵实验） 蛋白胨 10gNaCl 2.5g水 500ml制法：① 将上述成分混合于蒸馏水中加热溶解，调整 pH 至 7.4—7.6。② 加葡萄糖/乳糖 5g，加热溶解后加入 0.5ml 的 1.6%溴甲酚紫乙醇溶液，混匀。③ 配好的培育基分装到试管中，每支 5ml。内倒置配排净空气的杜氏小管，0.06MPa、30min 灭菌。2） 葡萄糖蛋白胨水培育基（用于甲基红和伏-普实验） 蛋白胨 2.5g葡萄糖 2.5g磷酸氢二钾 2.5g蒸馏水 500ml制法：① 将上述成分混合于蒸馏水中加热溶解，调整 pH 至 7.2，以滤纸过滤。② 配好的培育基分装到试管中，每支 5ml。0.06MPa 、30min 灭菌备用。 3） 蛋白胨水培育基（用于吲哚实验） 蛋白胨 10gNaCl 2.5g蒸馏水 500ml制法：① 将上述成分混合于蒸馏水中加热溶解，调整 pH 至 7.4-7.6。② 配好的培育基分装到试管中，每支 5ml。0.06MPa、30min 灭菌。4） 柠檬酸铁氨培育基（用于硫化氢实验） 蛋白胨 10g NaCl 2.5g 柠檬酸铁铵 0.25g 硫代硫酸钠 0.25g 琼脂 3g蒸馏水 500ml制法：① 先用水将琼脂和蛋白胨溶化，冷却到 60℃加入其他成分，溶化后加水至所需量。② 调整 pH 至 7.4-7.6。③ 配好的培育基分装到试管中，每支 5ml。0.06MPa、30min 灭菌。5） 明胶培育基（用于明胶液化实验）牛肉膏 2.5g 蛋白...
