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LB培养基怎样配制

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LB 培育基怎样配制 LB 一般被解释为 Luria-Bertani,然而根据其发明人贝尔塔尼(Giuseppe Bertani)的说法,这个名字来源于英语 lysogeny broth,即溶菌肉汤.LB 培育基是近年来用于培育基因工程受体菌(大肠杆菌)的常用培育基之一。 LB 培育基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培育基,有时又称普通培育基,含有酵母提取物、胰化蛋白胨和 NaCl。 酵母提取物:酵母经破壁后将其中蛋白质、核酸、维生素等抽提,再经生物酶解的富含小分子的氨基酸、肽、核苷酸、维生素等天然活性成分的淡黄色粉末,其中氨基酸含量 30%以上,总蛋白 50%以上,核苷酸 10%以上,广泛用作生物培育基和食品调味品制造原料。 胰化蛋白胨:一种优质蛋白胨,是以新奇牛肉和牛骨经胰酶消化,浓缩干燥而成的白色粉末,含有丰富的氮源、氨基酸等。 酵母提取物为微生物提供碳源、能源、磷酸盐、生长因子、维生素等;蛋白胨主要提供氮源;NaCl 主要提供微生物生长环境(如渗透压),其次是提供无机盐。 在配制固体培育基时还要加入一定量琼脂作凝固剂.琼脂在常用浓度下96℃时溶化,一般实际应用时在沸水浴中或垫以石棉网直接煮沸溶化。琼脂在40℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培育基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。 由于这种培育基多用于培育细菌,因此,要用稀酸或稀碱将其 pH 调至中性或微碱性,以利于细菌的生长繁殖。 LB 培育基配方(每升) 酵母提取物 5g 胰化蛋白胨 10g 氯化钠 10g NaOH 调 pH 至 7.0,121℃、20min 高压灭菌. LB 固体培育基 LB 培育基 1L 琼脂粉 15g NaOH 调 pH 至 7.0,121℃、20min 高压灭菌。 有时需在培育基中添加抗生素,琼脂凝固点为 40℃,所以添加抗生素最好在 50~55℃。 LB 培育基用途: 用于一般细菌培育,特别用于分子生物学试验中大肠杆菌的保存和培育. LB 培育基使用原理: 蛋白胨、酵母膏粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;葡萄糖提供碳源;琼脂是培育基的凝固剂。 LB 培育基配制方法 配制每升培育基,应该在 950 ml 去液态 lb 培育基离子水中加入:胰化蛋白胨 10g 酵母提取物 5g NaCl 10g 摇动容器直至溶质溶解。用 5mol/LNaOH 调 pH至 7。0。用去离子水定容至 1L。在 15psi 高压下蒸汽灭菌 20min。 1.LB 固体培育基 1L 和液体一样,加 15g 琼脂粉,一定要在温度降下之前加好抗固态 LB 培育基生素,并且倒好...

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