第 1 课时 动物细胞培养技术与单克隆抗体技术[目标导读] 1.结合教材 P53～55图文，掌握哺乳动物细胞培养条件和流程。2.分析教材 P55图3－14，理解动物细胞融合技术。3.单克隆抗体的制备过程。[重难点击] 1.动物细胞培养条件和流程。2.单克隆抗体的制备过程。1970 年，有两位科学家做了人—鼠细胞融合的实验，以证明细胞膜的流动性。思考该如何实现人—鼠细胞的融合，动物细胞融合后还有什么用途呢？植物体细胞杂交可得到杂种植株，动物细胞融合后能像电影上一样形成杂种动物个体吗？一、哺乳动物细胞培养技术1.动物细胞培养条件(1)培养基状态和成分：液体培养基，成分主要包括葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。特别提醒 动物细胞进行培养时通常要添加动物血清的原因有两点：一是补充合成培养基中不足的营养物质；二是为动物细胞提供与内环境相似的生活环境。(2)气体环境：需要足够的氧气和一定的二氧化碳。二氧化碳具有调节培养液 pH 的作用。(3)温度和 pH：培养温度要与动物体内温度保持一致；培养基的适宜 pH 为 7.2 ～ 7.4 。2.动物细胞培养流程(1)取材：取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官剪碎，加入适量胰蛋白酶或胶原纤维酶使细胞分散。(2)原代培养：经过滤、离心后将动物细胞接种到无菌的培养液中，在适宜的条件下进行静止或慢速转动培养，称为原代培养。① 贴壁生长：悬液的细胞贴附在培养瓶的表面，开始有丝分裂，其数目以指数增长的方式增多。② 接触抑制：当细胞铺满培养瓶的整个表面后，就形成致密的单层细胞层，此时细胞分裂停止，不再继续生长。(3)传代培养：贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞增殖，即为传代培养。① 细胞生长到 10 代左右时，出现生长停滞，大部分细胞衰老死亡。② 极少部分细胞可以传到 40 ～ 50 代，遗传物质没有(填“有”或“没有”)发生改变。③ 有些细胞(如肿瘤细胞)遗传物质发生了改变，可以无限制的传代下去。结合动物细胞培养的过程分析下列问题：1.为什么要取动物的胚胎或幼龄动物的组织或器官细胞进行细胞培养？答案 这类细胞具有较强的分裂能力，容易培养。2.培养过程中两次使用胰蛋白酶，目的有何不同？答案 第一次是将组织分散成单个细胞，第二次是将贴满瓶壁的细胞分散成单个细胞。3.能用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗？答案 胃蛋白酶作用的适宜 pH 约为 2，多数动物细胞培养的适宜 pH 为 7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境...
