专题 5 DNA 和蛋白质技术 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定教材习题点拨（一）旁栏思考题1．为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂？答：蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞胀裂，再加上搅拌的机械作用，就加速了鸡血细胞的破裂（细胞膜和核膜的破裂），从而释放出 DNA。2．加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？答：洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于 DNA 的释放；食盐的主要成分是 NaCl，有利于 DNA 的溶解。3．如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？答：研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全，提取的 DNA 量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4．此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分？答：可能含有核蛋白、多糖和 RNA 等杂质。5．为什么反复地溶解与析出 DNA，能够去除杂质？答：用高盐浓度的溶液溶解 DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质；用低盐浓度使 DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此，通过反复溶解与析出 DNA，就能够除去与DNA 溶解度不同的多种杂质。6．方案二与方案三的原理有什么不同？答：方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白，从而使提取的 DNA 与蛋白质分开；方案三利用的是 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同，从而使蛋白质变性，与 DNA 分离。（二）练习1．答：提取 DNA 的第一步是材料的选取，其目的是一定要选取 DNA 含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难；第二步是 DNA 的释放和溶解，这一步是实验成功与否的关键，要尽可能使细胞内的 DNA 全部溶解；第三步是 DNA 的纯化，即根据 DNA 的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将 DNA 与杂质分开；最后一步是对 DNA 进行鉴定，这是对整个实验的结果的检测。2．答：提取蛋白质比提取 DNA 的难度大。这是因为，与 DNA 相比，蛋白质对温度、盐浓度、pH 等条件要敏感得多，很容易失活；并且蛋白质的空间结构多种多样，理化性质各不相同，使得蛋白质的提取没有一种统一的方法，只能根据蛋白质的特性摸索提取的条件设计特定的方法。
