专题 5 DNA 和蛋白质技术 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定教材习题点拨(一)旁栏思考题1.为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂
答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂),从而释放出 DNA
2.加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么
答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于 DNA 的释放;食盐的主要成分是 NaCl,有利于 DNA 的溶解
3.如果研磨不充分,会对实验结果产生怎样的影响
答:研磨不充分会使细胞核内的 DNA 释放不完全,提取的 DNA 量变少,影响实验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
4.此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分
答:可能含有核蛋白、多糖和 RNA 等杂质
5.为什么反复地溶解与析出 DNA,能够去除杂质
答:用高盐浓度的溶液溶解 DNA,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使 DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质
因此,通过反复溶解与析出 DNA,就能够除去与DNA 溶解度不同的多种杂质
6.方案二与方案三的原理有什么不同
答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的 DNA 与蛋白质分开;方案三利用的是 DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与 DNA 分离
(二)练习1.答:提取 DNA 的第一步是材料的选取,其目的是一定要选取 DNA 含量较高的生物材料,否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;第二步是 DNA 的释放和溶解,这一步是实验成功与否的关键,要尽可能使细胞内的 DNA 全部溶解;第三步是 DNA 的纯化,即根据 DNA 的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大限度地将 DNA 与杂质分开;最后一步是对 DNA 进行鉴定,这是对整个实验的结果的检测