专题 5 DNA 和蛋白质技术 课题 1 DNA 的粗提取与鉴定庖丁巧解牛知识•巧学 一、提取 DNA 的方法1.基本思路利用 DNA 与 RNA、蛋白质和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取 DNA，去除其他成分。2.DNA 的理化性质（1）DNA 的溶解性，DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NaCl 溶液中溶解度不同，此外，DNA 不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用上述特点可达到分离 DNA 的目的。（2）DNA 对酶、高温和洗涤剂的耐受性,蛋白酶能水解蛋白质，但是对 DNA 没有影响。大多数蛋白质不能忍受 60～80 ℃的高温，而 DNA 在 80 ℃以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对 DNA 没有影响。要点提示 DNA 的溶解度与 NaCl 溶液浓度的关系：当 NaCl 溶液浓度低于0.14 mol/L时，随浓度的升高，DNA 的溶解度降低；当 NaCl 溶液浓度高于0.14 mol/L时，随浓度升高，DNA 的溶解度升高。3.DNA 的鉴定DNA 遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定Ｄ.Ａ的试剂。知识拓展 蛋白质的溶解度与盐溶液浓度的关系：在中性盐溶液中，低浓度时，蛋白质的溶解度较高即盐溶现象；高浓度时，蛋白质的溶解度较低，并可析出即盐析现象。二、实验设计1.实验材料的选取一定要选取 DNA 含量较高的生物材料，否则会由于实验过程中或多或少的损失而造成检测的困难。2.破碎细胞，获取含 DNA 的滤液以动物细胞为实验材料时，破碎细胞较容易，例如，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。以植物细胞为材料时，充分研磨破坏了细胞壁，洗涤剂中的表面活性剂成分能够与膜蛋白结合从而破坏细胞膜，这些为核 DNA 的释放提供了通道。3.去除滤液中的杂质根据 DNA 的溶解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性，最大限度地将 DNA 与杂质分开。4.DNA 的析出与鉴定难点剖析 在 DNA 的析出步骤中，用玻璃棒搅拌时，注意动作要轻缓，以免加剧 DNA 分子的断裂，导致 DNA 分子不能形成絮状沉淀。盛放鸡血细胞液的容器，最好是塑料容器。鸡血细胞破碎以后释放出的 DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内 DNA 的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附一部分，提取到的 DNA 就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中的 DNA 损失。辨析比较 （1）实验过程中有两次需要加入蒸馏水，第一次的目的...
