实验 5 加酶洗衣粉的使用条件和效果(略) 实验 6 α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测[学考报告]知识内容考试属性考情解读α淀粉酶的固定化及淀粉水解作用的检测加试1.尝试用吸附法制作固定化 α淀粉酶。2.运用固定化 α淀粉酶进行淀粉水解的测定。3.说明酶固定化的方法及制作原理。4.通过此实验探讨固定化酶的应用价值一、酶与固定化酶酶的定义酶是活细胞产生的具有催化作用的一类有机物,它是生物体内各种化学反应的催化剂。大多数酶是蛋白质,少数是 RNA。固定化酶将水溶性的酶用物理或化学方法固定在某种介质上,使之成为不溶于水而又有酶活性的制剂。将酶改造成固定化酶的原因由于酶在水溶液中很不稳定,且不利于工业化使用,所以要将酶改造成固定化酶。酶固定化的方法:吸附法、共价偶联法、交联法和包埋法等。固定化酶作用的机理将固定化酶装柱,当底物经过该柱时,在酶的作用下转变为产物。二、淀粉水解的过程及其在淀粉指示剂下的颜色反应淀粉――→糊精――→麦芽糖――→葡萄糖 遇碘显蓝色 遇碘显红色 遇碘不显色 遇碘不显色三、α淀粉酶的固定化及淀粉水解的实验实验原理(1)用吸附法将 α淀粉酶固定在石英砂上,一定浓度的淀粉溶液经过固定化酶柱后,可使淀粉水解成糊精,用淀粉指示剂 KI I 2 指示液测试,流出物呈红色,表明水解产物糊精生成。(2)本实验使用的酶是枯草杆菌的 α淀粉酶,其作用的最适温度为 50 ~ 75 ℃;最适pH 为 5.5 ~ 7.5 。实验步骤(1)淀粉溶液流经固定化酶柱:将灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管加淀粉溶液,使该溶液以 0.3 mL/min 的流速过柱。(2)接取流出物:待从固定化酶柱中流出 5 mL 的溶液后,接收0.5 mL 流出液。(3)流出物鉴定:在流出物中加入 KI I 2 溶液,观察颜色。用水稀释 1 倍后再观察颜色。(4)洗涤、保存固定化酶柱:实验后,用 10 倍柱体积的蒸馏水洗涤此柱。放置在 4 ℃冰箱中保存。(5)重复实验:几天后取出冰箱中该固定化酶柱,重复实验,观察结果。实验结果的比较1.如何证明洗涤固定化酶柱的流出液中没有淀粉酶?提示:可在试管中加入 1 mL 可溶性淀粉,再加几滴淀粉酶柱流出液,保温几分钟后用碘液检验。如仍显蓝色,则流出液中没有淀粉酶了。2.耐高温的淀粉酶有哪些可能的用途?提示:可以在高温下使淀粉水解快,而且酶不会因高温而失活,所以可在一些需要高温加热同时又要水解淀粉的反应中使用。 固定化酶的特点及...