第二节 植物种苗脱毒技术掌握植物种苗脱毒的基本过程
一、种苗脱毒把茎尖分生组织从感染病毒的植株上剥离,在离体条件下进行组织培养,从而获得不含病毒的脱毒苗,这一过程称为种苗脱毒
二、脱毒苗的培养实例1.马铃薯脱毒苗的培养(1)取材和消毒将欲脱毒的马铃薯块茎催芽,剪芽并剥去外叶,用自来水冲洗 10 min,在无菌室内用质量分数为 5%的漂白粉溶液消毒后,用无菌水冲洗 2~3 次
(2)剥离和接种取马铃薯芽的尖端 1~2 cm,在解剖镜下,用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织,露出顶端圆滑的分生区,用解剖针细心剥取所需的茎尖(约 0
5 cm),接种于 MS 培养基上,切面接触培养基
(3)培养于 25 ℃、1 500~3 000 lx 光照下培养,当长成 3~4 片叶的小植株时,即可移栽
2.草莓脱毒苗的培养3.探究切取茎尖的最佳长度在进行种苗脱毒时,切取的茎尖越小,脱毒效果就越好,但组织培养的速度就越慢,越不容易成活;如果切取的茎尖大一些,组织培养虽容易成功,但脱毒效果却很差
污染的预防污染就是指在组织培养过程中,培养容器内滋生菌斑,使培养材料不能正常生长发育,从而导致培养失败的现象
植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖
由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差,所以对培养条件的要求较高,对无菌操作的要求非常严格
污染有两种类型:(1)细菌污染:菌斑呈黏液状,界限比较明显,一般接种后 1~2 天即能发现
主要是大肠杆菌和链球菌
一般是由接种人员造成的
(2)真菌污染:菌斑呈绒毛状、絮状,界限不明显,伴有不同颜色的孢子,接种后 3~10 天才能发现
主要是霉菌污染,可能是植物材料灭菌不当造成的
可以通过以下措施做好预防
(1)防止外植体带菌
①选择好外植体采集时期和采集部位
外植体采集以春秋为宜,优先选择地上部分作为外植体,阴雨天勿采,晴天下午采,采前