第二节 植物种苗脱毒技术掌握植物种苗脱毒的基本过程。一、种苗脱毒把茎尖分生组织从感染病毒的植株上剥离，在离体条件下进行组织培养，从而获得不含病毒的脱毒苗，这一过程称为种苗脱毒。二、脱毒苗的培养实例1．马铃薯脱毒苗的培养（1）取材和消毒将欲脱毒的马铃薯块茎催芽，剪芽并剥去外叶，用自来水冲洗 10 min，在无菌室内用质量分数为 5%的漂白粉溶液消毒后，用无菌水冲洗 2～3 次。（2）剥离和接种取马铃薯芽的尖端 1～2 cm，在解剖镜下，用解剖刀小心地除去茎尖周围的叶片组织，露出顶端圆滑的分生区，用解剖针细心剥取所需的茎尖（约 0.1～0.5 cm），接种于 MS 培养基上，切面接触培养基。（3）培养于 25 ℃、1 500～3 000 lx 光照下培养，当长成 3～4 片叶的小植株时，即可移栽。2．草莓脱毒苗的培养3．探究切取茎尖的最佳长度在进行种苗脱毒时，切取的茎尖越小，脱毒效果就越好，但组织培养的速度就越慢，越不容易成活；如果切取的茎尖大一些，组织培养虽容易成功，但脱毒效果却很差。污染的预防污染就是指在组织培养过程中，培养容器内滋生菌斑，使培养材料不能正常生长发育，从而导致培养失败的现象。植物组织培养不同于扦插、分根、叶插等常规无性繁殖。由于植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，所以对培养条件的要求较高，对无菌操作的要求非常严格。污染有两种类型：（1）细菌污染：菌斑呈黏液状，界限比较明显，一般接种后 1～2 天即能发现。主要是大肠杆菌和链球菌。一般是由接种人员造成的。（2）真菌污染：菌斑呈绒毛状、絮状，界限不明显，伴有不同颜色的孢子，接种后 3～10 天才能发现。主要是霉菌污染，可能是植物材料灭菌不当造成的。可以通过以下措施做好预防。（1）防止外植体带菌。①选择好外植体采集时期和采集部位。外植体采集以春秋为宜，优先选择地上部分作为外植体，阴雨天勿采，晴天下午采，采前喷杀虫剂、杀菌剂或套塑料袋。②在室内或无菌条件下进行预培养。③外植体严格灭菌。做灭菌效果试验，多次灭菌和交替灭菌。（2）保证培养基及接种器具彻底灭菌。①分装时，注射器勿与瓶接触，培养基勿黏瓶口。②检查封口膜是否有破损。③扎瓶口要位置适当、松紧适宜。④保证灭菌时间和高压锅内温度。⑤接种工具用前彻底灭菌。⑥工作服、口罩、帽子等布质品定期进行湿热灭菌。（3）操作人员严格遵守无菌操作规程。如一定要规范着装，操作过程中不说话等。（4）保证接种与培养环境清洁...
