第 1 课时 蛋白质的分离与提取学习导航明目标、知重点难点 掌握电泳法分离大分子的原理
(重点) 运用常用的方法提取和分离蛋白质
(重、难点) [学生用书 P48]一、阅读教材 P71～72分析蛋白质的分离与纯化1．生物细胞中的蛋白质提取(1)在提取蛋白质时，可以采用研磨与超声波结合的方法将生物组织或细胞完全破碎，使蛋白质从细胞中释放出来，并使其溶解在适当的抽提液中
(2)抽提液的选择需要根据蛋白质的特性而定，一般酸性蛋白质用偏碱性溶液抽提，碱性蛋白质用偏酸性溶液抽提，脂蛋白等则可用有机溶剂抽提
2．蛋白质的分离方法(1)离心沉降法：通过控制离心速度，使分子大小、密度不同的蛋白质发生沉降分层
(2)薄膜透析法：利用蛋白质分子不能透过半透膜的特性，使蛋白质与其他小分子化合物分离的方法
(3)凝胶色谱法① 概念：根据蛋白质分子量的大小差异对其进行有效分离的方法
② 原理a．凝胶b．分离的过程进入凝胶颗粒内部的难易程度路程移动速度小分子蛋白质容易较长较慢大分子蛋白质无法进入较短较快(4)电泳法：将所带电荷的数量和性质不同的蛋白质从混合样品中分离并纯化出来
二、阅读教材 P73～77完成血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳及凝胶色谱法分离血红蛋白的操作1．血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳配制试剂→准备器材→架滤纸桥→浸泡薄膜→细心点样→平悬薄膜→实施电泳→染色→漂洗→脱色
2．凝胶色谱法分离血红蛋白样品处理→血红蛋白的释放、分离和透析→凝胶的制备→色谱柱的装填→样品的加入→洗脱与收集
判一判(1)酸性蛋白质用酸性溶液抽提，水溶性蛋白质用透析液抽提，脂溶性蛋白质用稀碱性溶液抽提
(×)(2)电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其电性相反的电极移动的过程
(√)(3)电泳时泳动速度取决于带电颗粒的大小、形状、所带静电荷多少
(√)(4)离心沉降法和薄膜透析法分离蛋白质的原理是一样的
(×)(5)凝胶色谱
