第二章 细胞工程第一节 动物细胞培养1.简述动物细胞培养的基本条件和过程。(重点)2.说明细胞株与细胞系的特点和区别。(难点)3.简述动物细胞培养的意义。动 物 细 胞 培 养 的 概 念 与 基 本 条 件1.动物细胞培养的概念细胞培养是细胞工程中最基础的技术,它是把机体的某一组织或器官取出,分散为单个细胞,使其在人工培养条件下继续生存、生长甚至增殖的过程。2.细胞培养的基本条件(1)严格的无毒无菌条件离体培养的细胞已失去了对微生物和有毒物质的防御能力。(2)基本营养物质和生长因子(3)适宜的温度和酸碱度(4)气体环境探讨:动物细胞培养时采取哪些措施得到无菌、无毒的环境?提示:(1)对培养液、所有的培养用具进行无菌处理。(2)在培养液中添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染。(3)定期更换培养液,以清除代谢产物,防止对细胞自身造成伤害。探讨:动物细胞进行培养时为什么通常添加动物血清?提示:血清中由于含有许多未知成分,会对细胞的生长和增殖有促进作用。一般来说,动物细胞体外培养需要满足以下条件:(1)无菌、无毒的环境;(2)营养,如需要糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分;(3)适宜的温度和 pH;(4)适宜的气体环境。1.下列关于动物细胞培养液的叙述,不正确的是( )A.为了防止培养过程中出现细菌污染,可以在培养液中添加抗生素B.细胞培养液中必须有糖、氨基酸等化合物以及动物血清等天然成分C.空气中再混入 5%的 CO2主要作用是维持培养液的 pHD.培养液应该定期更换防止代谢产物积累对细胞自身造成危害【解析】 动物细胞培养液通常需要加入动物血清、血浆,有时也采用无血清培养。1【答案】 B2.体外培养小鼠肝脏细胞,对于研究器官的生理、病理过程及其机制意义重大。下图是一个培养新鲜小鼠的肝脏的装置示意图。请回答下列问题。(1)操作前,要将小鼠肝脏切成小薄片,并且用________酶处理,获得单个细胞,有利于肝脏细胞_______________________________________________________________________。(2)图中的培养液相当于小鼠体内肝脏细胞直接生活的________,其理化性质主要包括____________________等三个方面。(3)气室中充入 5%CO2和 95%O2,其中 O2的作用是______________________________________________________________,其反应式为:__________________________________________________。(4)在培养过程...