基因工程考点例析山东省青岛市第九中学辛建福考点1DNA重组技术的基本工具例1.基因工程要用到的操作工具——限制性核酸内切酶，主要存在于原核生物中，一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，这体现了酶的（）A.高效性B．具有多样性C.专一性D．催化活性受外界条件影响解析：酶具有特性之一是具有专一性，它是指一种酶只能催化一种或一类化合物的化学反应。一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA分子，这显然体现了酶的专一性。答案：C例2.如图为DNA分子的切割和连接过程：（1）EcoRl是一种酶，其识别序列是，切割点是与之间的键。切割结果产生的DNA片段末端形式为。（2）不同来源DNA片段结合，在这里需要的酶应是连接酶，此酶是通过在与之间形成键，而起“缝合”作用的。还有一种连接平末端的连接酶是。解析：本题考查DNA限制酶和DNA连接酶的有关知识。从图中可看出EcoRⅠ限制酶可将DNA片段切割，应为限制酶，其识别序列是GAATTC，切点在G与A之间的磷酸二酯键，切割后产生的是黏性末端。DNA连接酶可将不同来源的DNA片段结合，由图中可看出，此酶是通过在G与A之间形成磷酸二酯键的形式连接两片段，连接的黏性末端，对应前面的EcoRⅠ限制酶，此酶应为EcoRⅠDNA连接酶，T4DNA连接酶可连接平末端。答案：（1）限制性核酸内切GAATTC鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯黏性末端（2）E·coliDNA鸟嘌呤脱氧核苷酸腺嘌呤脱氧核苷酸磷酸二酯T4DNA连接酶考点2基因工程的基本操作步骤例3.下列关于基因工程的叙述，正确的是（）A.基因工程常以抗菌素抗性基因作为目的基因B.细菌质粒是基因工程最常用的载体C.通常用一种限制酶处理含目的基因的DNA，用另一种处理运载体DNAD.选择目的基因——人胰岛素基因时只能从胰岛B细胞中选取解析：基因工程常以抗菌素抗性基因作为标记基因而不是目的基因；基因工程在实际操作中一定要注意用同一种限制酶来处理目的基因DNA和载体DNA，使它们产生相同的黏性末端；人胰岛素基因在所有细胞中均存在，只是在胰岛8细胞中能够表达，所以理论上在所有细胞中均可以提取，但是，由于只在胰岛8细胞中能够表达，所以在该细胞中较容易通过直接分离或人工合成法获得。答案：B例4.下列不属于基因工程中获取目的基因的方法的是（）A.利用DNA合成仪人工直接进行合成B.利用PCR技术扩增实现大量生产C.利用限制酶在受体细胞中获得D.从基因文库中获取解析：获取目的基因的常用方法有直接分离法和人工合成法。目前常用的方法主要有以下几种：从基因文库中获取目的基因；利用PCR技术扩增目的基因；通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成等等。直接分离法主要是利用限制酶在供体细胞中对DNA分子进行切割，然后再利用特定的方法进行筛选即可获得。答案：C例5.下列技术依据DNA分子杂交原理的是（）①观察DNA在细胞中的分布②检测目的基因是否导入细胞③检测目的基因是否完全转录并翻译④检测目的基因是否进行转录A.②③B.①③C.②④D.①④解析：观察DNA在细胞中的分布基本方法是利用甲基绿对细胞中的DNA分子进行染色，再利用显微镜进行观察目的基因是否导入以及是否转录出相应的RNA，一般是利用放射性同位素做标记（标记目的基因），利用DNA分子杂交原理来实现的。最后检测目的基因是否翻译出蛋白质方法很多，一般是利用抗原—抗体杂交的原理来实现的。答案：C例6.采用基因工程的方法培育抗虫棉，下列导人目的基因的做法正确的是（）①将毒素蛋白注射到棉受精卵中②将编码毒素蛋白的DNA序列，注射到棉受精卵中③将编码毒素蛋白的DNA序列，与质粒重组导入细菌，用该细菌感染棉的体细胞，再进行组织培养④将编码毒素蛋白的DNA序列，与细菌质粒重组，注射到棉的子房并进入受精卵A．①②B．②③C．③④D．①④解析：基因工程一般要经历四个步骤；获取目的基因、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。所以在导人目的基因前，首先要获得目的基因即本题中的编码毒素蛋白的DNA序列，然后要将目的基因与运载体结合即与细菌质粒重组。完成上述两步以后才将目的基因导人受体细胞即棉的体细...
