(整理)ABO血型鉴定操作规程.VIP免费

精品文档精品文档1.0原理ABO血型鉴定操作规程2.03.04.05.05.15.26.06.16.26.36.46.56.66.77.07.1根据红细胞上和血清（或血浆）中有无A抗原和（或）B抗原及其抗体，将血型分为A型、B型、AB型及O型。可利用红细胞凝集试验，通过正、反定型鉴定ABO血型。正定型正定是指用已知抗-A、抗-B血清来检测受检红细胞上有无相应的A抗原和（或）B抗原；反定型反定是指用已知A1型、B型红细胞来检测受检血清（或血浆）中有无相应的抗-A和（或）抗-B。原始样品要求5mL静脉全血。样品容器和添加剂真空试管，EDTA.K2抗凝/普通试管，不抗凝。检测环境要求温度：18℃～27℃，湿度：30%～70%。所需材料和设备设备普通离心机、免疫血液学离心机、显微镜、恒温水箱、定时器。材料抗-A、抗-B血清、ABO标准抗原红细胞试剂、移液器、加样吸头、生理盐水（NS）、干净空试管。检测操作过程将受检标本以1000g离心5min，使标本血浆/血清与红细胞分离，吸取红细胞，用NS洗涤三次后，配成3%～5%红细胞悬液。取6支小试管，分别标记“-A”、“-B”、“自身”、“Ac”、“Bc”、“Oc”。在“-A”、“-B”管中分别加入抗-A和抗-B血清各50L，其余管加入受检血浆/血清各100L。在“-A”、“-B”、“自身”管中加入受检者3%～5%红细胞悬液各50L，摇匀。在“Ac”、“Bc”、“Oc”管中分别加入A1、B、O红细胞试剂各50L，摇匀。1000g离心15sec，轻轻悬浮红细胞，观察结果并记录。根据实验需要，除室温下观察结果外，另可增加在4℃、37℃下观察结果。结果判断凝集强度判断标准见表1。精品文档精品文档表1凝集强度判断标准表精品文档精品文档凝集强度4+3+2+1+±-或θMFpHH判断标准红细胞凝集成一大块，液体背景透明，无游离红细胞数个大凝集块，液体背景透明，无游离红细胞有很多小凝集块，液体背景透明，无游离红细胞有许多很小的凝集块，肉眼可见，液体背景不透明，有游离红细胞微小的凝集块，肉眼很难看清，需要用显微镜观察无凝集，无溶血，全是游离红细胞混合凝集外观，镜下可见少数红细胞凝集，而大部分是游离红细胞部分溶血完全溶血7.2ABO血型结果判断见表2：正定型抗-A血清血抗-B血清血Ac表22血型结果判断表反定型定BcOc自身对照血型＋――＋―＋―＋―＋＋―＋―＋―――――――――ABOAB7.37.48.09.010.0注：“＋”表示凝集或溶血；“―”表示不凝集。正反定型不一致、ABO抗原减弱、抗-A或抗-B减弱、O细胞凝集时，排除人为操作错误后，执行《疑难血型鉴定操作规程》进行最终确认。根据上述判断标准，作出结论并记录在《免疫血液学检查实验记录》。结果报告根据实验结果，打印《免疫血液学实验报告》。报告的形式为：A型/B型/O型/AB型。实验结果解释实验结果为A型、B型、AB型，O型，说明受检者ABO血型分别属于A型、B型、AB型，O型。红细胞上分别有A抗原、B抗原、皆有A抗原和B抗原、皆无A抗原和B抗原；血浆中分别有抗-B、抗-A、抗-AB、皆无抗-A(B)。质量控制当受检标本与正、反定型试剂反应，凝集强度少于2+时，取标准抗-A、抗-B或A、精品文档精品文档B、O红细胞与正、反定型试剂反应，以验证试剂效能是否下降。精品文档精品文档11.011.111.211.311.411.511.611.711.8注意事项试管必须清洁、干燥，防止溶血。加样顺序一般先加血清，再加红细胞悬液，以便容易核实是否漏加血清。分型血清效价太低，抗原抗体比例不适当，可使反应不明显误判为阴性反应。用立即试管法可能不能测出亚型（如AX），需延长作用时间。观察结果时既要看有无凝集，更要注意凝集强度，此有助于亚型、类B或cisAB的发现。各种原因引起的红细胞溶解，容易误判为不凝集；部分溶血时，可溶性血型物质中和了相应的抗体，也会造成不凝集。受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（多见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或cisAB等，易被误判为不凝集。ABO正反定型不一致常见原因11.8.1分型血清效价太低，亲和力不强。11.8.2漏加、错加试剂或标本，试剂被污染或失效。11.8.3红细胞悬液过浓或过淡，抗原抗体比例不适当，使反应不明显误判为阴性结果。11.8.4受检者红细胞上抗原位点过少（如亚型）或抗原性减弱（多见于白血病或恶性肿瘤）以及类B或cisAB等...