第1页共7页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第1页共7页现代微生物发酵及技术教程复习资料发酵:利用微生物进行生长和代谢活动,并通过为现代化工技术,进行微生物代谢活动形成各种有用产品的过程,包括有氧和无氧的发酵。微生物发酵的特点发酵的催化作用都在细胞内进行;比表面积很大(表面积/体积);原料来源广,价格低廉;反应条件温和生产过程安全;设备“多能化”,代谢途径多样化;具有易变异性。发酵简史列文虎克发明了显微镜,算是微生物的发现者吧。巴斯德,贡献是彻底否定了自然发生学说,对免疫学的研究,首次制成狂犬疫苗,进行预防接种,正是发酵由微生物引起,创立巴氏消毒法。科赫,细菌学奠基人,贡献是正是炭疽病菌是炭疽病的病原菌,发现肺结核病的病原菌,提出了科赫法则,创立了分离纯化微生物的技术。应用:食品工业;医药保健食品工业;减缓资源能源衰竭;深入广泛的改善环境;农牧业增产诱变育种:就是人为地利用物理或化学等因素,使诱变对象细胞内的遗传物质发生变化,引起突变,并通过筛选获得符合要求的变异菌株的一种育种方法。紫外诱变的步骤:诱变处理将菌悬液倾于无菌培养皿中(内放一个磁力搅拌棒),置电磁力搅拌器上于超净工作台紫外灯下(距离30cm)照射0.5-1min。4.取0.1-0.2mL诱变后菌悬液于选择培养基平板上,用涂布器涂匀。置37℃暗箱培养48h。紫外线诱变,一般采用15W或30W紫外线灯,照射距离为20-30cm,照射时间依菌种而异,一般为1-3min,死亡率控制在50%-80%为宜。被照射处理的细胞,必须呈均匀分散的单细胞悬浮液状态,细胞浓度要适宜,以利于均匀接触诱变剂,并可减少不纯种的出现。同时,对于细菌细胞的生理状态则要求培养至对数期为最好。光修复可见光能够激活某些光复活酶,将照后受损的DNA部分进行修复,因此称之为光修复或光复活作用。光复活酶能识别嘧啶二聚体,并利用光所提供的能量使二聚体环打开而完成修复。(另外,低剂量紫外线诱变遭到可见光照射突变效应和致死作用均下降,而高剂量时发生致死作用的回复而突变效应不变)原生质体融合通过人为方法使遗传性状不同的两个细胞的原生质体进行融合,借以获得兼有双亲遗传性状的稳定重组子的过程。包括以下过程:将遗传性状稳定,带有不同遗传标记(一般为营养缺陷型和抗药性等)且具有互补优势的两个亲本通过酶(根据处理细胞壁组成的不同进第2页共7页第1页共7页编号:时间:2021年x月x日书山有路勤为径,学海无涯苦作舟页码:第2页共7页行选择,细菌放线菌——溶菌酶,放线菌还可用裂解酶2号、消色肽酶,酵母菌和霉菌——蜗牛酶、壳多糖酶、纤维素酶、半纤维素酶)解脱壁形成原生质体,一般使用聚乙二醇助融等量的原生质体(助融分为:生物——仙台病毒,物理——离心、电脉冲,化学——PEG+),原生质体再生即融合的原生质体重新形成细胞壁,最后检出并鉴定融合子。退化:菌种在培养或保藏过程中,由于自发突变的存在,出现某些原有优良生产性状的劣化、遗传标记的丢失等现象。是细胞群体中退化细胞从量变到质变的逐步演变的过程(在形态上的包子减少或颜色改变)复壮:狭义的复壮:是指在菌种已发生衰退的情况下,通过纯种分离和生产性能测定等方法,从衰退的群体中找出未衰退的个体,以达到恢复该菌原有典型性状的措施。广义的复壮:是指在菌种的生产性能未衰退前就有意识的经常进行纯种的分离和生产性能测定工作,以期菌种的生产性能逐步提高。实际上是利用自发突变(正变)不断地从生产中选种。(答题只用广义)菌种保藏的原理目的方法原理:人为创造合适的环境条件,使微生物的代谢处于不活跃生长繁殖受抑制的休眠状态尽可能减少其变异率,主要是低温、干燥、缺氧、营养缺乏等四方面的条件目的:1,使菌种不至于死亡绝种,不污染杂菌;2,使菌种保持优良的性状、高存活率、低变异率,以利于生产研究交换使用。方法:斜面保藏、液体石蜡保藏、载体保藏、悬液保藏、冷冻干燥保藏、寄主保藏乳糖操纵子:乳糖操纵子在缺乏乳糖等诱导物时,由调节基因(lacI)编码的调节蛋白(即lac阻遏物)一直结合在操纵基因上,抑制着结构基因转录的进行。当...