谷胱甘肽生物转化研究VIP免费

第1页共7页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第1页共7页生物转化法合成谷胱甘肽的研究张磊薛钊坤（浙江工业大学生物与环境工程学院杭州310014）摘要：本文以编号X23的藤黄八叠球菌为研究对象，研究其生物转化合成谷胱甘肽的可能性。通过从物理、化学和生物三方面因素改进转化条件：转化过程中以100mg/L湿菌含量加入新配制pH为7.5的转化液[1]37℃、转速200r/min的摇床转化6h，用超声波对含菌的转化液破壁10min，接着于3500r/min离心机离心20min后取上清液,为最佳的物理因素；通过正交实验分析方法得转化液最佳成份浓度为葡萄糖0.75mol/L、MgCl20.01mol/L、底物浓度0.03mol/L，找到并证实微量元素浓度20mg/L的ZnSO4·7H2O对谷胱甘肽合成酶有激活作用，为最佳化学因素；连续生物转化进行两步可使转化产量达到88.43mg/L，一次从发酵到转化两步的生产过程可产谷胱甘肽231.27mg/L，较原菌株只发酵的产量142.75mg/L提高61.94%。关键词：谷胱甘肽、藤黄球菌、生物转化RESERCHOFBIOLOGYSYNTHESISOFGLUTATHIONEZHANGLeiXUEZhao-Kun(CollegeofBiologyandEnvironmentEngineeringZhejiangUniversityofTechnology,Hangzhou,310014)Abstract:SarcinaluteastrainX23,whichwasstoredinthemicrobiologiclaboftheZhejianguniversityoftechnologywasstudiedforthebiologicaltransformofglutathione.Theconditionoftheglutathionebiologictransformandcomponentoftheproductiveliquidthroughwereimprovedthroughphysicalchemicalandbiologicfactors.TheproductiveliquidpH7.5containedSarcinalutea100mgcell/L,wasplacedinaflaskandincubatedat37℃withshakingat200r/minfor6h,thenthestrainwithproductiveliquidwassmashedfor10minbysonicate,supernatentwasgotbycentrifugationatthespeedof3500r/minfor20min,thatwastheoptimumphysicalfactor.Compositionoftheproductiveliquid,Glucose0.25mg/L、MgCl20.01mg/L、Aminoacids0.03mg/L.wasobtainedbythequadraticdesign.theZnSO4·7H2Oattheconcentrationof20mg/Lwhichwasdiscoveredandconfirmedcanactivatetheendosynthaseofglutathione,thatwastheoptimumchemicalfactor.Theresultindicatedthattheglutathioneproductionreached88.43mg/Laftertwostepsbiologictransformprocess,Theproductivityofglutathionecanbeobtained231.27mg/Lofduringthewholeprocess,whichwas61.94﹪higherthaninthesynthesis.Keywords:GlutathioneSarcinaluteabiologicsynthesis还原型谷胱甘肽（L-Glutathione，简称GSH）是由谷氨酸，半胱氨酸和甘氨酸构成的活性三肽。自1938年发表了由酵母备制谷胱甘肽的最早专利以来[3]，还原型谷胱甘肽在临床上有着广泛的应用，它能够防止皮肤色素沉积、改善皮肤光泽，是治疗肝病、重金属中毒、放射性损伤、肿瘤、白内障等疾病的有效药物，最近还发现谷胱甘肽可能具有抗艾滋病毒的功效。谷胱甘肽现在已广泛运用于食品加工的各个领域，在日本谷胱甘肽被认为是21世纪最有希望的保健食品之一。谷胱甘肽作为一种重要的氨基酸类生化药物，随着人们在食品添加剂、临床医学和运动营养学上对它的兴趣日益增长，市场需求量不断增加。第2页共7页第1页共7页编号：时间：2021年x月x日书山有路勤为径，学海无涯苦作舟页码：第2页共7页目前生产谷胱甘肽最普遍的方法是发酵法生产，发酵法生产谷胱甘肽基本以酵母发酵为主，国内外尚未见到以革蓝氏阳性菌产生的酶系催化合成谷胱甘肽的报道，本课题旨在弥补这一空白。由于GSH合成酶在细菌体内的活性和产量受细菌调控，因此要提高转化率一个重要途径是优化生物转化条件。本论文通过一定方法提取细菌中相应的活性酶，研究其最适转化条件和最佳配方以提高谷胱甘肽的生物转化率。由于藤黄八叠菌的生长周期仅为酵母的1/3，利用该细菌高产谷胱甘肽合成酶菌株进行转化法生产谷胱甘肽，可以大大缩短生产周期提高经济效益，促进产业化生产。1材料与仪器1.1菌种来源藤黄八叠球菌（浙江工业大学生物实验室收集和保藏）1.2培养基1.2.1斜面培养基（完全培养基）及培养条件[2]：培养基：葡萄...