分层限时跟踪练37微生物的培养与应用(限时:45分钟)1.(2015·全国卷Ⅰ)已知微生物A可以产生油脂,微生物B可以产生脂肪酶
脂肪酶和油脂可用于生物柴油的生产
回答有关问题:(1)显微观察时,微生物A菌体中的油脂通常可用________染色
微生物A产生的油脂不易挥发,可选用________(“”“”填萃取法或水蒸气蒸馏法)从菌体中提取
(2)为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落,可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样,并应选用以________为碳源的固体培养基进行培养
(3)若要测定培养液中微生物B的菌体数,可在显微镜下用________直接计数;若要测定其活菌数量,可选用________法进行计数
(4)为了确定微生物B产生的脂肪酶的最适温度,某同学测得相同时间内,在35℃、40℃、45℃温度下降解10g油脂所需酶量依次为4mg、1mg、6mg,则上述三个温度中,________℃条件下该酶活力最小
为了进一步确定该酶的最适温度,应围绕________℃设计后续实验
【解析】(1)油脂可被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色,被苏丹Ⅳ染液染成红色,因此油脂通常用苏丹Ⅲ或苏丹Ⅳ染色
不易挥发的物质大多采用萃取法进行提取,水蒸气蒸馏法一般用来提取易挥发的物质
(2)能产生脂肪酶的微生物B能利用脂肪(油脂)作为碳源,所以在制备选择微生物B的培养基时,应将油脂作为唯一的碳源
(3)用显微镜直接对微生物进行计数,需要用血细胞计数板
如果对活菌进行计数,则要用稀释涂布平板法涂布平板,培养后统计菌落数目,然后计算出活菌数量
(4)降解等量的油脂,需要的酶量越多,说明此温度下的酶的活力越小
所以三种温度中45℃下酶的活力最小
从三种温度下的实验结果可知,40℃下酶的活力最大,所以要想测定该酶的最适温度,应围绕该温度设计不同温度梯度,进行后续实验
【答案】(1)苏丹Ⅲ(或苏丹Ⅳ)萃取法