大肠菌群检测方法(中文翻译)VIP免费

3定义和简介3.1定义所有的大肠菌群均是发酵乳糖，革兰氏阴性，无牙孢的杆菌。官方的对大肠菌群的定义可能以培养温度（30、32、35、37）不同作评价；或以确定是否发酵乳糖产气作为定义的一个特征.大多数ISO和其他官方标准是利用发酵乳糖产气作为一个定义特征。而在ISO4832中则利用了在VRBL上的菌落大小作为其唯一的定义特征。鉴于这些定义的不同，建议实验室根据相关定义用相应的适当方法。国际标准：样品分析是否符合国际交易规范官方主市场调整定义：样品分析是否符合地方标准一般定义：样品分析是否符合一般规范。任何必要方法的调改必须通过市场实验室质量确认中心和雀巢研究中心食品安全微生物组的协助。以下为一些官方定义例子：*ISO4831大肠菌群是通过其在选择性肉汤上的生长和发酵乳糖产气能力来定义*AOACINTERNATIONAL,APHA/FDA定义大肠菌是指发酵乳糖产酸产气（T=32或35度）革兰氏阴性杆菌*ISO4832大肠菌群定义是根据其在VRBL-agar(30or35or37度)的菌落大小（最小5mm直径）和产酸情况。(T=30或35或37℃)3．1．1液体培养基中ISO4831大肠菌群是根据其在选择性肉汤中生长能力和发酵乳糖产气情况来定义.(T=30或35或37℃)AOACINTERMATIONAL,APHA/FA中大肠菌群是指发酵乳糖产酸产气革兰氏阴性杆菌。（T=32或35℃）由LI第一章概述，大肠菌群是指发酵乳糖气微生物群。3．1．2固体培养基中IOS4832大肠菌群定义是根据其在VRBL-agar(30or35or37度)的菌落大小（最小5mm直径）和产酸情况。(T=30或35或37℃)AOACINTERMATIONAL,APHA/FA中大肠菌群是指发酵乳糖产酸产气革兰氏阴性杆菌。基于以上定义可知大肠菌群在VRBL培养基上会形成5mm以上直径的红色菌落且在确认试验中发酵乳糖产气由LI第二章概述，大肠菌群是指在VRBL琼脂培养基上会形成特征性菌落且在确认试验中发酵乳糖产气微生物群。3．2简注BGLB：亮绿乳糖胆盐培养基肉汤LST：月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤MPN：最可能数VRBL：紫红胆汁琼脂4安全防范大肠菌群不表现为无害，注意实验室的良好操作。5参考资料5．1LIs中提到的及其它心要文件LI-00．700LI-00．702LI-00．743-25．2参考书目*美国公共健康协会(1985).日用品检验标准，华盛顿。DC*BruchezN(1996).ResearchNoteQS-TN960017:Detectionofcoliforms-lnprovementofLST*ColwellN.D.andM.D.Microbiologicaltechniques-Somestatisticalaspects.J.Sci.Fd.Agric_20(1969)573-579*ISO4831:1991:Microbiology-Generalguidancefortheenumerationofcoliforms-Mostprobablenumbertechnique.*ISO4831:1991:Microbiology-Generalguidancefortheenumerationofcoliforms-Colonycounttechnique.*MerckMicrobiologyManual2002http://chemdat.merck.de/mda/ch/de/index.html*U.S.FDA(1995).BacteriologicalAnalyticalManual,8thEdAOACinternational,Gaitheresburg,MD,pp4.01-4.296前面说法之修正完整修订本额外细节在大肠菌群计数、定义和分离改编中提供。7方法认可审批人签名日期编写者组领导部门领导CT-QM8附1安全说明2概述大肠菌群的研究与举例第一章液体培养基中的生长研究1方法原理接种至原倍或稀释后的选择性培养基中，30℃培养24-48小时，再通过转接阳性管进确认。摘要根据大肠菌群相应用的不同定义选用不同的培养温度（30℃/32℃/35℃/37℃）(查阅定义)2培养基的准备在使用化学药品前查阅Sigma/Aldrich化学药品安全指南或其它相应手册或地方权威提供的安全数据表。认真阅读附1中的安全说明。更多的安全信息可从NEC/QS中获得。2.1月桂基硫酸盐胰蛋白胨肉汤（LST）根据制造商说明配制培养基，如是非成品干粉则可按以下方法配备（g/L）单倍料（g）双倍料(g)胰蛋白胨20.040.0乳糖5.010.0磷酸二氢钾2.755.5磷酸氢二钾2.755.5氯化钠5.010.0月桂硫酸钠0.10,2蒸馏水1000ml1000mlPH6.6-7.0(25℃)将以上化合物水中溶解，必要时可以加热，调整PH单倍料分装到16*160mm的试管中每管10ml双倍料分装到18*180mm的试管每管10ml121℃,15分钟灭菌为了避免月桂硫酸钠沉淀，LST室温贮藏不应超过4星期。注意由于样品引起高百分比的假阳性，也就说气体的产生是由于其它微生物而非大肠菌群。在LST肉汤灭菌后加入...