目前营养指标采用的方法青稞中葡聚糖测定方法的归类即酶法(国际标准)、凝胶色谱法(不仅可以定量还可以测定分子量)和刚果红法(高通量定量)优缺点介绍:酶法利用特异性β-葡聚糖水解酶将样品中β-葡聚糖水解为水溶性纤维二糖和纤维三糖,然后β-葡萄糖苷酶进一步将纤维二糖和纤维三糖水解为葡萄糖,再以葡萄糖氧化酶法测定葡萄糖含量,最后换算成β-葡聚糖的含量
该方法局限性在于所用酶的纯度要求较高,且燕麦β-葡聚糖水解需完全,如果酶的纯度低,其他酶干扰,其他糖类的水解会导致测定结果偏高;而燕麦β-葡聚糖如果水解不完全会使测试结果偏低目前商业化的试剂盒,测试过程相对简便,结果可靠,但不属于高产出测试方法,价格较高,严重制约其作为生产过程中质量监控的评测方法
凝胶色谱柱的分离是基于聚合物分子在溶液中的尺寸大小,所以分析时,对于物质的纯度要求比较高,否则不能确定色谱峰代表的是否为同一种物质
在实际测试时可以使用凝胶色谱法定量
但相比酶法,硬件投入高,一般情况下,需要先对样品进行多糖提纯,多糖醇沉过程需要过夜等待,操作时间长,不属于高产出测试方法,无法用于生产过程中的质量监控
除了定量分析外,凝胶色谱法还能够测定分子量的分布,多一个维度表征和保障产品的品质,而分子量的分布可能与产品的功效有关
刚果红可以和具有连续β-糖苷键的β-吡喃型葡聚糖以及半纤维素的乳糖-葡甘露聚糖聚合发生作用,形成颜色浓郁的多聚糖-刚果红络合物由于该方法所用试剂均为常规试剂,操作简单方便快速,成本低,属于高产出方法,尤其可以满足生产过程中快速测定之需,因此被广泛采用
但在实际测试中,β-葡聚糖纯度会影响刚果红法准确度对于高纯度样品,结果与酶法一致;但对于低纯度产品,刚果红法测得结果通常比酶法及凝胶色谱法高,测试结果约是酶法的1
酶法经国际多个实验室的评估和验证,认为是准确和可靠的,在国际上被普遍接受并采用