第1页共6页U3000高效液相色谱仪操作规程及封面规程（eg—XX）设备编号（）仪器名称U3000液相色谱仪操作规程编制审核批准xx年月日U3000髙效液相色谱仪操作规程一基本原理U3000髙效液相色谱系统由：①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。使用髙效液相色谱时，液体待检测物由流动相带入色谱柱，通过压力在色谱柱中移动，由于试样中各组分在色谱柱内固定相与流动相间分配或吸附特性的差异，不同的物质组分顺序离开色谱柱，经检测器检测得到不同的色谱峰信号，依据组分的保留时间和响应值（峰面积或峰髙）进行定性和定量分析。二操作前准备1、1流动相的配制：1、1、1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。1、1、2根据流动相的性质确定采用有机膜（0、45um）还是水相膜（0、45um）对流动相进行过滤。1、1、3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。1、2对照品供试品处理：1、2、1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0、l~lmg/mL（根据检测结果再适当调节溶第2页共6页液的浓度）。l、2、2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0、45um）还是水相针头滤膜（0、45um）进行过滤。1、3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。三操作顺序1、开机2、1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2、2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2、3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2、4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。2、5双击在桌面上的Chromeleon7图标（工作站主程序）。2、6在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。2、7旋开泵上的排液阀（两圈以上）；设置A通道为100%，点击“冲洗”，然后再出现的对话框中点击“忽略并执行”；（默认冲洗5分钟）；然后分别“冲洗”流路中其他通道气泡；排完气泡后关闭排液阀；2、8设置流动相的比例及流速后，点击“马达”。此时泵自动会以设置的流速进行运行。2、9在控制面板“柱温箱”控制框中，设置准备分析样品所使用第3页共6页的柱温箱温度。3、0清洗进样口；2、样品分析3、1建立仪器方法：3、2建立处理方法及报告模板（此步骤可以省略，直接调用以前的）：3、3建立序列：3、4打开氘灯（待系统压力稳定后约15min后再开灯）：在控制面板“Detector”控制框中，选中“紫外灯”选框，及“可见灯”选框（如果波长在可见范围）。3、5在控制面板“UV”控制框中，设置波长，采集频率（20HZ）；点击“监视基线”，选中通道1并确定。3、6待基线稳定后，点击“监视基线”，点击确定，关闭查看基线。3、7点击左下方“数据”，并选中要分析的序列，然后点击“开始”启动样品表进行分析（如果序列里有完成的样品，则会变成继续，点继续；如果该序列还在队列中则会显示删除，点击删除后在点击继续）；3、8在审计跟踪里出现“等待pump-inputl上的进样响应”，此时迅速将手动进样器扳到load位置，缓慢注入样品适量（注意不能有气泡），然后迅速将手动进样器扳到inject位置；3、9样品全部检测结束后，如果不再分析样品应立即关掉氘灯，第4页共6页延长氘灯使用的寿命、5、关机：5、1冲洗色谱柱（如果使用了缓冲盐，首先使用10%甲醇水溶液冲洗色谱柱30分钟，然后使用纯甲醇冲洗色谱柱30分钟）。5、2关闭泵马达，断开连接，关闭工作站。5、4关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源。5、5关闭计算机。关闭UPS电源或稳压电源。四注意事项6、1溶剂泵的使用注意事项：使用时要留心防止溶剂瓶内的流动相被用完，否则空泵运转会磨损柱塞、缸体和密封环，最终产生漏夜。防止任何固体微粒进入泵体，因为尘埃或其他任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀，因此应预先除去流动相中的任何固体颗粒。流动相过滤，可采用滤膜（0、2um或0、45um）等滤过。输液泵的工作压力不能超过规定的最髙压力，否则会使高压密封环变形，产生...
