组织学与胚胎学HistologyandEmbryology第一页,共二十四页。绪论Introduction组织学histology第二页,共二十四页。组织学(histology):研究机体微细结构及其相关功能的科学。组织上皮组织结缔组织肌肉组织神经组织细胞细胞间质器官系统人体细胞cell:是机体形态结构与功能的基本单位。细胞间质intracellular:由细胞分泌产生,对细胞起支持、营养、保护等作用,构成细胞生存的微环境。组织tissue:由一些形态结构相似、生理功能相近的细胞和细胞间质组成的群体结构,是构成机体器官的基本成分。分为上皮组织、结缔组织、肌组织和神经组织等4种基本组织。器官organ:由组织有机组合而成,具有一定的形态结构,并执行特定的生理功能。如心、肝、脾、肺、肾。系统system:由一些结构连续、功能相关的器官组合而成,完成连续的生理活动。一、组织学的定义和研究内容第三页,共二十四页。组织学结构观察组织学结构光镜结构:用光学显微镜观察的结构(lightmicroscope,LM,简称光镜)电镜结构:又称超微结构,电子显微镜下观察的结构(electronmicroscope,EM,简称电镜)第四页,共二十四页。二、组织学的常用研究方法问题解决方法观察对象太小显微镜放大观察对象无色,无反差染色(如HE染色)观察对象生化成分不同组织化学、免疫组织化学观察对象是活体培养组织学研究过程中存在的问题和解决方法第五页,共二十四页。组织学与胚胎学最常用的技术,最大放大倍数常为1000倍。1.切片术最常用组织切片标本制备技术基本程序:①取材:0.5cm②固定:甲醛、乙醇③脱水:如果是冰冻切片则不需要此步骤④包埋:石蜡、火棉胶、树脂⑤切片:组织切片机、冰冻切片机⑥脱蜡:如果是石蜡包埋则需要此步骤⑦染色:最常用染色方法为HE染色⑧封片:2.非切片法:涂片法、铺片法、磨片法等。(一)光学显微镜技术第六页,共二十四页。常用染色方法:HE染色苏木精(Hematoxylin)碱性染料细胞核中的染色质细胞质中的核糖体染成蓝色(嗜碱性)染成红色(嗜酸性)细胞质细胞间质成份伊红(Eosin)酸性染料第七页,共二十四页。嗜碱性:对碱性燃料有较强亲和力,可使细胞核内的染色质及细胞质内的核糖体等结构染成蓝紫色嗜酸性:对酸性染料有较强亲和力,可使多数细胞的细胞质染成粉红色中性:与两种染液亲合力都不强组织结构的嗜色性嗜碱性嗜酸性第八页,共二十四页。A嗜银性B嗜铬性C异染性其它染色方法第九页,共二十四页。普通光学显微镜(lightmicroscope,LM)是观察组织细胞微细结构最常用的工具光学部分:起放大作用光镜的分辨率约为0.2mµ可放大1500倍左右机械部分:第十页,共二十四页。⑷倒置显微镜(invertedmicrscope)⑸暗视野显微镜(darkfieldmicroscope)⑹偏光显微镜(polarizationmicroscope)几种特殊光学显微镜术⑴相差显微镜(phasecontrastmicroscope)用于观察生活细胞和末经染色细胞的形态结构神经干细胞培养⑵荧光显微镜(fluorescencemicrscope)是用以观察细胞、组织内荧光物质的分布神经球⑶激光共聚焦扫描显微镜(confocallaserscanningmicroscope,CLSM)由激光光源、共焦成像扫描系统、电子光学系统和微机图象分析系统四部份构成。可对样品进行断层扫描重建三维图像,进行体视学分析;测定细胞内pH、钙浓度等;精确地检测、识别组织细胞的微细结构及其变化。又称细胞CT。CLSM第十一页,共二十四页。透射电镜(transmissionelectronmicroscope,TEM)观察细胞内部结构;分辨率为0.1-0.2nm,可放大几万-几十万倍扫描电镜(scanningelectronmicroscope,SEM)观察组织或细胞表面的立体结构冰冻蚀刻复型技术(freezeetchreplicamethod)观察细胞断裂表面形态结构X-射线显微分析术(X-raymicroanalysis)研究细胞、组织内元素种类分布和含量冷冻割断技术(freezecracking)扫描电镜铸型技术(scanningelectronmicroscopecasting)超高电压电镜(ultravoltageelectronmicroscope,UEM)扫描探针电镜(scanningprobemicroscope,SPM)透射电镜与照片TEM淋巴细胞扫描电镜与照片1.纤毛2.微绒毛冰冻蚀刻细胞冷冻断裂肾小球右下线粒体冰冻蚀刻照片分析电镜X线微区分析分析电镜-X线微区分析图片(二)电子显微镜技术(electronmicroscope,EM)第十...