消毒与灭菌BEAConfidential.|1第一页，共二十八页。微生物控制的意义防止疾病的发生和传播防止食品和物品等的微生物污染防止微生物对原材料的破坏〔腐败和变质〕第二页，共二十八页。灭菌〔sterilization〕杀灭所有的微生物，包括细菌的芽孢；消毒〔disinfection〕杀灭病原微生物；防腐〔antiseptic〕抑制微生物的生长繁殖；化疗(Chemotherapy)：化疗是指利用具有选择毒性的化学物质如磺胺、抗生素等对生物体内部被微生物感染的组织进行治疗，以杀死组织内的病原微生物，但对机体本身无毒害作用的治疗措施。无菌〔asepsis〕不含活菌无菌技术〔aseptictechnique〕在进行外科手术或别离转接及培养时防止其它微生物污染实验材料或实验材料污染环境的操作方法。第三页，共二十八页。消毒、灭菌的方法一般可分为：热力灭菌法辐射杀菌法物理学方法滤过除菌法超声波杀菌法枯燥和低温抑菌法等化学方法消毒防腐第四页，共二十八页。〔一〕热力灭菌法分类：干热灭菌法湿热灭菌法1干热灭菌法A燃烧：B烧灼：C干烤：D红外线灭菌：一物理消毒灭菌法第五页，共二十八页。燃烧动物尸体，废弃物。烧灼金属制品〔镊子，接种环等〕。干烤灭菌〔1〕160/2h℃烤箱〔oven〕〔2〕适用于耐高温物品。〔3〕温度下降至90~100℃时方可开启箱门，否那么干烤物品会骤冷，破碎或可燃物燃烧。第六页，共二十八页。2.湿热灭菌法A巴氏消毒法：63℃/30min，72℃/15-30s，82℃/3sB煮沸消毒法：100℃，30min难以杀灭芽胞C流通蒸气消毒法：100℃，15-30min难以杀灭芽胞D间歇蒸汽灭菌法：100℃，15-30min，37℃过夜培养〔3次〕E高压蒸气灭菌法:〔1〕含糖培养基:113℃〔8Ib/in2〕，20~30min〔2〕一般耐高温物品(如培养基)：121.3℃，103.46kPa〔15Ib/in2〕，15~30min第七页，共二十八页。高压蒸汽灭菌Hirayama高压灭菌锅全自动高压蒸汽灭菌锅第八页，共二十八页。湿热与干热灭菌效果的比较热型温度〔℃〕时间布层内的温度〔℃〕灭菌效果〔h〕20层40层100层湿热90-105.33101101101.5完全干热130-1404867270.5不完全第九页，共二十八页。湿热比干热灭菌好的原因：1细菌蛋白质在有水的情况下易于凝固变性2湿热穿透力强3湿热蒸气有潜热存在，水蒸气凝固成水释放潜热，迅速提高被灭菌物体的温度第十页，共二十八页。湿热对一般营养体和孢子的杀灭条件：•多数细菌和真菌的营养细胞：在60℃左右处理5-10分钟；•酵母菌和霉菌的孢子：用80℃以上温度处理；•细菌的芽胞：121℃处理15分钟以上；第十一页，共二十八页。影响热力灭菌法的因素1、温度与作用时间2、微生物因素3、灭菌对象的性质第十二页，共二十八页。〔二〕光线与射线的消毒作用1日光与紫外线机理：细胞DNA吸收能量，形成胸腺嘧啶二聚体，干扰DNA复制和蛋白质合成。特点：穿透力弱,只适用于物体外表和空气；产生对人有害的臭氧2电离辐射：包括X射线和γ射线机制：干扰DNA的合成；破坏细胞膜；产生过氧化氢等特点：穿透力强，不升高温度第十三页，共二十八页。〔四〕超声波的消毒作用可裂解细菌，尤其对G+更敏感主要用于粉碎细胞，提取细胞组分或制备抗原等(五〕渗透压高渗引起细胞脱水产生质壁别离。常用盐腌，糖渍来保存食品。〔三〕滤过除菌法a.适用于不耐热、不能用化学方法处理的液体和气体：抗生素、维生素、酶、血清、病毒溶液、毒素溶液、细胞培养液b.不能除去病毒和支原体c.常用膜滤器：0.22~0.45mµ第十四页，共二十八页。二化学消毒灭菌法机制：1、使微生物蛋白质凝固变性,发生沉淀.如酒精等.2、破坏菌体的酶系统,影响菌体代谢.如过氧化氢等.3、降卑微生物外表张力,增加细胞膜的通透性,使细胞发生破裂或溶解.如来苏儿等酚类物质.第十五页，共二十八页。消毒剂的主要种类、浓度及用途1酚类：作用：菌体蛋白凝固；损伤细胞膜；灭活酶类浓度：石炭酸为3%-5%、来苏儿为2%用途：地面、器具外表和皮肤的消毒2醇类：作用机制：使菌体蛋白变性与凝固；干扰细菌代谢浓度：乙醇70%-75%用途：用于皮肤的消毒和体温计等的浸泡第十六页，共二十八页。3重金属盐类：使细菌发生变性和沉淀；酶活性丧失〔1〕2%红汞：皮肤、粘膜和小创伤〔2〕0.05-0.01%升汞：非金属器皿4氧化剂...
