【旧高考】【生物-选修3:现代生物科技专题】猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)俗称蓝耳病,由蓝耳病毒引发
研究表明,CD163蛋白是该病毒入侵宿主的必需受体,我国科研人员利用单碱基编辑技术成功将CD163基因的第7个外显子中的CAA编辑为TAA,从而实现CD163基因的敲除,已知UAA、UAG为终止密码子
回答下列问题:(1)基因敲除前,为充分了解目标基因CD163的功能,科研人员首先对该基因进行PCR扩增,扩增时需要加入2种引物和(填一种酶),其中引物根据设计合成
扩增n次后,需要消耗的引物数是
随后将扩增获得的CD163基因导入小鼠受精卵中,该过程常用的方法是
(2)单碱基编辑器主要由碱基脱氨酶、Cas9蛋白变体以及sgRNA三部分组成,其中sgRNA能引导Cas9蛋白变体与碱基脱氨酶形成的复合物定向作用于目标碱基序列,该过程主要利用原则
将CD163基因的第7个外显子中的CAA编辑为TAA,从而实现CD163基因敲除的原理是,该基因敲除过程引起的变异属于
(3)试从“基因表达产物与性状的关系”的角度分析,利用单碱基编辑技术获得的敲除CD163基因的猪可降低PRRS患病风险的原因是
答案:(1)热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)一段已知的CD163基因的核苷酸序列2n+1-2显微注射法(2)碱基互补配对将CD163基因的第7个外显子中的CAA编辑为TAA,使编码CD163蛋白的mRNA上的终止密码子提前出现,导致CD163蛋白的翻译过程提前终止,从而实现基因敲除基因突变(3)CD163基因敲除后猪的细胞不能编码正确的蓝耳病毒受体CD163蛋白,导致蓝耳病毒不能入侵宿主细胞,从而降低PRRS患病风险解析:(1)利用PCR技术扩增CD163基因时,需要根据一段已知的CD163基因的核苷酸序列来设计合成2种引物,同时在扩增时需要加入热稳定DNA聚合酶(或Taq酶)
在PCR扩增过程