单个实验室化学检测方法的确认NationalAssociationofTestingAuthorities(NATA)概要•基本情况•单个实验室方法确认的接受•什么是确认方法？•什么是方法确认？•化学检测方法确认需要十个步骤例如:确认一个方法去检测动物组织中抗生素的残留基本情况•NATATechnicalNote17(newversion)•IUPAC‘HarmonizedGuidelinesforSingle–Lab.Validation’•LGC(UK)‘In-houseMethodValidation–aGuideforChemicalLaboratories’标准方法•OrganisationforInternationalStandardisation(ISO)•AmericanSocietyforTestingMaterials(ASTM)•AssociationofOfficialAgriculturalChemists(AOAC)•StandardsAustralia•BritishStandardsPublicationofStandardMethodsaspecialist,corebusinessoftheorganisationsconcerned标准方法要通过很多实验室的合作研究来确认.•过程慢•在方法需要与方法建立之间有很长的时间滞后性方法验证MethodVerification•没有方法确认这么严格•是否实验室运行都得要专门的标准方法?单个实验室方法确认的承认•EU(Decision2002/657/EU)•CodexCommitteesMethodsofAnalysisandSamplingResiduesofVeterinaryDrugsinFoodsPesticideResidues•NationalRegulatorsAPVMAAQISFSANZNRSStates&Territories•贸易伙伴TradingPartners什么是确认方法?•该方法被证明适用于该目的•使用该方法所测得结果可靠;结果合理可用于作决定什么是方法确认?•系统评价一个方法，提供客观证据证明该方法能够满足特定检测目标的需要。•证明该方法是符合NATA要求的。方法确认16107893542VALIDATEDMETHOD61078935421步骤1:方法的具本要求‘为特定明确用途的特殊需求’….需要对所发展的方法的检测对象有的具本要求。什么是方法的需要?•你要检测什么?•在什么样品基质中?•你需要检测到什么浓度水平?•对结果你需要有多大可靠性?•多少浓度范围?•是否客户还有其它特殊需要?例如：具本要求:动物组织中抗生素残留检测•‘自由’化合物或结合化合物?•仅母体,或母体加代谢物?•特殊动物组织,如.猪的肾脏•调整检测限,所需的定量限（LOQ）?•在定量限（LOQ）或MRL值上的可接受的确证限?•样品里的预期浓度?•所需的检测周期?•多个的还是单个样品?步骤1:方法的具本要求对这些具本要求的确认将根本定义方法的范围步骤1:方法的具体要求为了确认方法的具本要求,还有哪些方法的工作特性需要发展呢?……以下九个步骤VALIDATEDMETHODDEVELOPSPECS6107893542步骤2:方法选择性‘在(与样品一起提取出的)干扰存在下检测结果的准确性’目标:没有重大干扰•方法内在的选择性变化•通过分析含有可能干扰的样品来检查例如：方法选择性:动物组织中抗生素的残留检测进行系列在日常检测中可能碰到的样品基质试验用交叉反应法检查(如免疫测定法)VALIDATEDMETHODDEVELOPSPECS61078954SELECTIVITY3步骤3:线性范围…对方法而言是用一个计算模型去定义仪器响应与浓度之间的关系通常线性模型由图表表示测定线性范围要求:•6点校准标样，每点重复测定两次•在可能浓度的0-150%或50-150%•严格评价数据,不要只依赖r2值R2=0.984ResponsevsConcentrationR2=0.98402468101214160102030405060CONCENTRATIONRESPONSE步骤3:线性范围…对方法而言是用一个计算模型去定义仪器响应与浓度之间的关系通常线性模型由图表表示测定线性范围:6点校准标样，每点重复测定两次在可能浓度的0-150%或50-150%严格评价数据,不要只依赖r2值还要考虑可能的基质效应ResponsevsConcentration02468100246810CONCENTRATIONRESPONSEwithmatrixwithoutmatrixResponsevsConcentration02468100246810CONCENTRATIONRESPONSE(additiveeffect)withoutmatrixwithmatrix例如：线性范围:动物组织中抗生素残留检测•所有方法应用的基本原则•检查所有目标化合物的线性•范围覆盖期望浓度的0–150%•清楚基质效应VALIDATEDMETHODDEVELOPSPECS6107895SELECTIVITYLINEARITY4步骤4:灵敏度‘响应变化与浓度变化的比例’例如：灵敏度:抗生素在动物组织中的残留检测•可能每天变化•每天例行检查保证满意的灵敏度•操作时带入部分QC(质量控制)样品VALIDATEDMETHODDEVELOPSPE...
