细胞生物学试验指导VIP免费

细胞生物学实验指导细胞生物学的发展总是依赖于技术和实验手段的进步，所以学习细胞生物学的技术和方法至关重要。实验一普通显微镜及其使用（装片观察）一、目的要求：1、掌握显微镜的构造、油浸系的原理、使用方法、保护要点。2、参观了解其他各类显微镜。二、材料：普通光学显微镜及其他显微镜、细菌标本片、香柏油、二甲苯、擦镜纸。三、方法和步骤：1、介绍普通光学显微镜的构造机械部分：镜座、镜臂、镜筒、转换器、载物台、调焦螺旋。光学部分：接目镜、物镜、反光镜、聚光器。2、油镜的原理及使用方法原理：油镜头的晶片细小，进入镜中的光线亦少，光线经聚光器，通过载玻片进油镜时，由于空气介质和玻璃介质的折射率不一样，光线因折射而损失，使视野更暗。在载玻片和油镜之间加上和玻璃折光系数相同的香柏油，光线直接进入镜头，不发生折射，视野明亮，便于观察。3、如何维护显微镜：机械部分的维护，光学部分的维护。4、注意事项：（1）观察油镜载片时，先在载片上有菌影的地方滴1-2滴香柏油，然后放载物台中央，眼侧面看，慢慢降低油镜浸入香柏油中，镜头几乎接触标本。再用左眼在接目镜观察，同时慢慢旋动粗螺旋提起镜筒至能模糊看到物彖时，再转动微调螺旋，直至看清晰为止。注意镜头离开油，就不能看清，重新按刚才的步骤进行。（2）油镜使用过后，立即用擦镜纸擦拭镜头，如油渍已干，则可用香柏油粘二甲苯擦拭镜头，再用干净擦镜纸擦去二甲苯。5、观察几种细菌标本片。6、示教看相差显微镜和荧光显微镜。四、作业及思考题：1、油镜的原理是什么？2、光线强弱如何调节？与哪些部件有关？实验二、细胞脸的渗透性实验目的了解细胞膜的渗透性及各类物质进入细胞的速度。实验原理将红细胞放入数种等渗溶液中，由于红细胞对各种溶质的透性不同，有的溶质可以渗入，有的不能渗入，渗入的溶质能够提高红细胞的渗透压，所以促使水分进入细胞，引起溶血，由于溶质透入速度互不相同，因此溶血时间也不相同。实验用品一、器材50ml烧杯，试管（1〜10cm）,lOnil移液管，试管架。二、材料羊血。三、试剂0.17moVL氯化钠,0.17moL'L氯化胺,0.17moLL醋酸胺，0.17mol/L硝酸钠,0.12moV草酸胺，0.12mol/硫酸钠，0.32mol/葡萄糖，0.32mo"甘油，0.32mol/乙醇，0.32mol/丙酮。实验方法一、羊血细胞悬液取50ml小烧杯一个，力口1份羊血和10份0.1711101^氯化钠，形成一种不透明的红色液体，此即桶释的羊血。二、低渗溶液取试管一支，加入10ml蒸馆水，再加入lml稀释羊血，注意观察溶液颜色的变化，有不透明的红色逐渐澄清，说明红细胞发生破裂造成100%红细胞溶血，使光线比较容易透过溶液。三、羊红细胞的滲透性1、取试管一支，加入0.17mol/L氯化钠10ml,再加入lmH希释羊血，轻轻摇动，注意观察溶液颜色有无变化？有无溶血现象？为什么？2、取试管一支，加入0.17mol/L氯化胺10ml,再加入lmH希释羊血，轻轻摇动，注意观察溶液颜色有无变化？有无溶血现象？为什么？3、分别在另外8种等渗溶液中进行同样实验。步骤同2。实验结果并对实验结果进行比较和分析。实验三、线粒体和液泡系的超活染色与观察活体染色是能使生活有机体的细胞或组织特异性着色但对活样品又没有毒害作用的一种活体染色方法，其目的是显示生活细胞内的某些结构，而不影响细胞的生命活动和产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。活体染色技术可用来研究生活状态卞的细胞形态结构和生理、病理状态。通常把活体染色分为体内活体染色与体外活体染色两类。体外活体染色又称超活染色，它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块，以染料溶液浸染，染料被选择固定在活细胞的某种结构上而显色。活体染料之所以能固定、堆积在细胞内某些特殊的部分，主要是靠染料的“电化学”特性。碱性染料的胶粒表面带阳离子，酸性染料的胶粒表面带有阴离子，而被染的部分本身也是具有阴离子或阳离子，这样，它们彼此之间就发生了吸引作用。但并非任何染料均可用于活体染色，理论上应选择那些对细胞无毒性或毒性极小的染料，且使用时需要配成桶淡的溶液。一般说来，最为适用的是碱性染料，这可能是因为它具有溶解在类脂质(如卵磷脂、胆固醇等)的特性...