食品微生物学检验食品微生物学检验沙门氏菌检验沙门氏菌检验GBGB4789.4-20104789.4-2010志贺氏菌检验志贺氏菌检验GB/GB/TT4789.54789.5--20020033菌种传代与保藏菌种传代与保藏沙门菌的分布沙门菌的分布沙门菌广泛存在于自然环境中。沙门菌广泛存在于自然环境中。通过沙门菌病患者或健康带菌的人和动物的排泄物污染环通过沙门菌病患者或健康带菌的人和动物的排泄物污染环境和食品。境和食品。易于污染的高危食物：畜禽肉类、蛋、奶及其制品。易于污染的高危食物：畜禽肉类、蛋、奶及其制品。沙门菌在肉类中不分解蛋白质，不产生靛基质，所以当食沙门菌在肉类中不分解蛋白质，不产生靛基质，所以当食品污染了沙门菌后，通常没有感官性状的改变。品污染了沙门菌后，通常没有感官性状的改变。沙门氏菌检验程序目的：修复损伤的细菌细胞。目的：修复损伤的细菌细胞。缓冲蛋白胨水缓冲蛋白胨水(BPW)(BPW)肉汤：是基础增菌培养基，不含肉汤：是基础增菌培养基，不含任何抑制成分，有利于受损伤的沙门菌复苏。使受损伤任何抑制成分，有利于受损伤的沙门菌复苏。使受损伤的沙门菌细胞恢复到稳定的生理状态。的沙门菌细胞恢复到稳定的生理状态。方法：方法：25g25g（（mLmL）样品置于盛有）样品置于盛有225mLBPW225mLBPW的无菌的无菌均质袋中，用拍击式均质器拍打均质袋中，用拍击式均质器拍打1min1min～～2min2min。若样。若样品为液态，不需要均质，振荡混匀，直接进行培养。于品为液态，不需要均质，振荡混匀，直接进行培养。于36±1℃℃36±1℃℃培养培养8h8h～～18h18h。。前增菌前增菌轻轻摇动培养过的样品混合物，移取轻轻摇动培养过的样品混合物，移取1mL,1mL,转种于转种于10mL10mLTTBTTB内内,,于于42±1℃42±1℃培养培养1818～～24h24h。同时。同时,,另取另取11mL,mL,转种于转种于10mLSC10mLSC内内,,于于36±1℃36±1℃培养培养1818～～24h24h。。分别用接种环取增菌液分别用接种环取增菌液11环环,,划线接种于一个划线接种于一个BSBS琼脂平琼脂平板和一个板和一个XLDXLD琼脂平板（或琼脂平板（或HEHE琼脂平板或显色培养基平琼脂平板或显色培养基平板）。于板）。于36±1℃36±1℃分别培养分别培养1818～～24h(XLD24h(XLD琼脂平板、琼脂平板、HEHE琼脂平板、显色培养基平板琼脂平板、显色培养基平板))或或40h40h～～48h(BS48h(BS琼琼脂平板脂平板))，观察各个平板上生长的菌落。，观察各个平板上生长的菌落。选择性增菌与分离选择性增菌与分离划线接种，分离纯化菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色菌落为黑色有金属光泽、棕褐色或灰色,,菌落周围培养基可呈黑菌落周围培养基可呈黑色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落色或棕色；有些菌株形成灰绿色的菌落,,周围培养基不变。周围培养基不变。国产BS进口BS进口XLD国产XLD菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，菌落呈粉红色，带或不带黑色中心，有些菌株可呈现大的带光泽的黑色中心，或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心或呈现全部黑色的菌落；有些菌株为黄色菌落，带或不带黑色中心菌落为紫红色菌落为紫红色初筛微生初筛微生物物菌落颜色菌落颜色沙门氏菌沙门氏菌紫色紫色((直径直径约约1mm)1mm)柠檬酸杆柠檬酸杆菌属菌属蓝色蓝色((直径直径约约1mm)1mm)变形杆菌变形杆菌无色或被抑无色或被抑制制注意事项注意事项亚硫酸铋琼脂（亚硫酸铋琼脂（BSBS）：该培养基制备过程不宜过分加热，）：该培养基制备过程不宜过分加热，以免降低其选择性，应在临用时配制，超过以免降低其选择性，应在临用时配制，超过48h48h不宜使用。不宜使用。将已挑菌落的平板储存于将已挑菌落的平板储存于2℃2℃～～5℃5℃或室温至少保留或室温至少保留24h24h，，以备必要时复查。以备必要时复查。志贺氏菌志贺氏菌需氧或兼性厌氧。需氧或兼性厌氧。在普通琼脂和在普通琼脂和SSSS平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、平板上，能形成圆形、微凸、光滑湿润、无色半透明、边缘整齐、中等大小的菌落。无色半透明、边缘整齐、中等大小的菌落。在肉汤中呈均匀混浊生长，无菌膜...
