蛋白质电泳与操作蛋白质电泳与操作福建中医药大学康复医学研究所福建中医药大学康复医学研究所林炜博士林炜博士2012.4.132012.4.13QuestionsQuestions::•什么是氨基酸?什么是氨基酸?•氨基酸有何结构特点?氨基酸有何结构特点?•什么是肽?什么是肽?•肽是如何形成的?肽是如何形成的?•形成肽的化学键是什么?形成肽的化学键是什么?•什么是蛋白质?什么是蛋白质?•蛋白质的结构特点是什么?蛋白质的结构特点是什么?蛋白质特性蛋白质特性氨基酸(氨基酸(aminoacidaminoacid))•含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合含有一个碱性氨基和一个酸性羧基的有机化合物。是蛋白质的基本组成单位。物。是蛋白质的基本组成单位。氨基酸的酸碱性质氨基酸的酸碱性质•氨基酸在水溶液或结晶内基本上均以兼性离子氨基酸在水溶液或结晶内基本上均以兼性离子或偶极离子的形式存在。或偶极离子的形式存在。•兼性离子兼性离子::又称为两性离子是指在同一个氨基又称为两性离子是指在同一个氨基酸分子上带有能释放出质子的酸分子上带有能释放出质子的NH3+NH3+正离子和能正离子和能接受质子的接受质子的COO-COO-负离子,因此氨基酸是两性电负离子,因此氨基酸是两性电解质。解质。•氨基酸的等电点氨基酸的等电点::氨基酸的带电状况取决于所氨基酸的带电状况取决于所处环境的处环境的PHPH值,改变值,改变PHPH值可以使氨基酸带正值可以使氨基酸带正电荷或负电荷,也可使它处于正负电荷数相等,电荷或负电荷,也可使它处于正负电荷数相等,即净电荷为零的两性离子状态。使氨基酸所带即净电荷为零的两性离子状态。使氨基酸所带正负电荷数相等即净电荷为零时的溶液正负电荷数相等即净电荷为零时的溶液pHpH值称值称为该氨基酸的等电点为该氨基酸的等电点((isoelectricpointisoelectricpoint)。)。多肽多肽((polypeptidepolypeptide))•一个氨基酸的羟基与另一个氨基酸的羧基脱水缩合形成肽键(一个氨基酸的羟基与另一个氨基酸的羧基脱水缩合形成肽键(peptidepeptidebondbond)。)。•通常由通常由10-10010-100个氨基酸分子脱水缩个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫合而成的化合物叫多肽,多肽,它们的分子它们的分子量低于量低于10,000Da10,000Da((DaltonDalton))..也有也有文献把由文献把由2-102-10个氨基酸组成的肽称个氨基酸组成的肽称为寡肽(小分子肽);为寡肽(小分子肽);10-5010-50个氨基个氨基酸组成的肽称为多肽;由酸组成的肽称为多肽;由5050个以上个以上的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。的氨基酸组成的肽就称为蛋白质。蛋白质特性蛋白质特性蛋白质结构一级结构一级结构((primarystructureprimarystructure))氨基酸之间以肽键形成的肽链中氨氨基酸之间以肽键形成的肽链中氨基酸的排列顺序。基酸的排列顺序。二级结构二级结构((secondarystructursecondarystructuree))蛋白质分子中多肽链沿一定方蛋白质分子中多肽链沿一定方向盘绕和折叠的方式。向盘绕和折叠的方式。三级结构三级结构((tertiarystructuretertiarystructure))蛋白质的二级结构基础上借助各种蛋白质的二级结构基础上借助各种次级键卷曲折叠成特定的球状分子次级键卷曲折叠成特定的球状分子结构的空间构象。结构的空间构象。四级结构四级结构((quaternarystructurequaternarystructure)多亚基蛋白质分子中各个具有三级多亚基蛋白质分子中各个具有三级结构的多肽链,以适当的方式聚合结构的多肽链,以适当的方式聚合所形成的蛋白质的三维结构。所形成的蛋白质的三维结构。关于电泳关于电泳•电泳(电泳(ElectrophoresisElectrophoresis):):是指是指带电荷的粒子或分子在电场中移带电荷的粒子或分子在电场中移动的现象。动的现象。•电泳技术:电泳技术:利用带电粒子或者分利用带电粒子或者分子在电场中移动速度不同而达到子在电场中移动速度不同而达到对粒子或分子进行分离的技术。对粒子或分子进行分离的技术。电泳的相关参数电泳的相关参数•电荷:电荷:粒子或分子的电荷性质决定其在电场中的迁移方向。粒子或分子的电荷性质决定其在电场中的迁移方向。•分子大小...