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第十六章 临床电泳分析仪器2012VIP免费

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第十六章临床电泳分析仪器最常见的电泳仪该仪器开展的主要项目有:1、血清蛋白电泳2、CK同功酶3、CK同功酶亚型4、LDH同功酶5、AKP同功酶6、r-GT同功酶7、脂蛋白电泳8、血红蛋白电泳9、胆固醇电泳10、结合珠蛋白电泳11、免疫固定电泳12、脑脊液蛋白电泳13、尿液蛋白电泳蛋白电泳氨基黑染色胃肠道的蛋白丢失各区带含量均减少,在各种胃肠道功能紊乱时,Alb丢失的同时也伴有球蛋白的丢失。常继发于狭窄性心包炎,先天性肠道林巴管扩张,肠道炎症等。蛋白电泳丽春红染色急性烧伤病人的电泳图谱大面积烧伤病人,其图谱显示Alb、α1、γ显著减少而α2明显增加.临床上产生低蛋白血症,其原因:一是血清渗出,二是皮肤丢失急性肝脏疾病电泳技术用途-分离、鉴定、纯化•在临床诊断中:血清蛋白,血红蛋白糖蛋白、脂蛋白的分离鉴定和含量的测定,还有血清酶以及免疫化学的检验。它为医生提供了诊断某些疾病的依据如肝炎,肾病等•在科研工作中主要用来提纯蛋白质和蛋白质的结构分析。电泳技术已广泛用于蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、无机离子等成分的分离和鉴定,甚至还用于细胞和病毒的研究。电泳仪的定义电泳(electrophoresis)是指带电荷的溶质或粒子在电场中向着与其本身所带电荷相反的电极移动的现象。利用电泳现象将多组分物质分离、分析的技术叫做电泳技术(electrophoresis-technique)。可以实现电泳分离技术的仪器称之为电泳仪(electrophoresister);第一节电泳原理一、电泳的基本原理物质分子在正常情况下一般不带电,即所带正负电荷量相等,故不显示带电性。但是在一定的物理作用或化学反应条件下,某些物质分子会成为带电的离子(或粒子),不同的物质,由于其带电性质、颗粒形状和大小不同,因而在一定的电场中它们的移动方向和移动速度也不同,因此可使它们分离。蛋白质电泳动画.swf若溶液里一电量为q的带电粒子,在场强为E的电场中以速度v移动,则它所受到的电场力F1应为:F1=QE根据斯托克司定律,在液体中泳动的球状粒子所受到的阻力F2,为:F2=6πηRV式中η为介质的粘度系数,R为粒子半径。当二力平衡,即F1=F2时,粒子作匀速运动。且有V=QE/6πrη从上式可以看出移动速度不仅与本身性质有关,还受到外界因素的影响影响电泳的因素(一)电场强度(二)溶液的pH值(三)溶液的离子强度(四)电渗作用(五)粒子的迁移率(六)吸附作用一般来说,不同成分的物质,其颗粒本身所带的电量以及颗粒的半径(或摩擦系数)都是不同的,所以它们的迁移率各不相同。利用这一原理即可把物质中各种不同的成分分离开来。例如,血清蛋白中含有各种蛋白质(清蛋白、α1,α2,β,γ球蛋白等),电泳分析技术的分类电泳分析技术的分类11、根据电泳电压的高低、根据电泳电压的高低常压电泳常压电泳高压电泳高压电泳22、根据电泳中是否使用支持物、根据电泳中是否使用支持物自由电泳自由电泳::在自由溶液中进行的电泳方法区带电泳区带电泳::更常用的电泳是将试样放在支持介质(载体)上进行泳动,并在支持介质上形成一个个区带33、按支持物的物理性状不同、按支持物的物理性状不同•①①纸电泳纸电泳•②②纤维薄膜电泳纤维薄膜电泳•如醋酸纤维素电泳如醋酸纤维素电泳•③③凝胶电泳凝胶电泳•如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳如琼脂糖、聚丙烯酰胺凝胶电泳44、按支持物的装置形式不同:、按支持物的装置形式不同:•①①平板式电泳平板式电泳•②②垂直板式电泳垂直板式电泳•③③垂直柱式电泳垂直柱式电泳•电泳分析仪可分为两大类:•临床实验室常规类,如全自动荧光/可见光双系统电泳仪、全自动醋纤膜电泳仪、全自动琼脂糖电泳仪;•科研为主兼做临床样本类,如双向电泳及双向电泳,液相色谱--质谱联用、高效毛细管电泳及高效毛细管电泳--质谱联用、高效毛细管芯片电泳、DNA测序系统。•从目前临床•实验室的要求来看电泳仪必须具有下列功能:•1.全自动,必须达到人员离机作业,由点样到出报告没有人工动作。•2.速度快,所有项目应在60min内完成,同时具备急诊项目,如CK、LD等同工酶及亚型项目。•3.项目全,除了血清蛋白、脂蛋白、血红蛋白、CK、LD同工酶等传统项目外,必须还能完成尿蛋白...

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