细胞游离亚铁原卟啉检测技术作者：温鑫细胞游离亚铁原卟啉（CellsFreeFerrousProtoporphyrinFH）是恶性肿瘤发生过程中产生的因果性生物标志因子。FH是含亚铁原卟啉蛋白的分解产物。FH具有强氧化作用，导致细胞自稳调节功能紊乱。FH含量具有连续可测量性，且与细胞癌变程度呈密切正相关。采用直接生物学介质（组织渗液）进行靶向定位检测，即可显示细胞恶变过程。细胞游离亚铁原卟啉（FH）主要来源线粒体膜间腔膜间腔嵴间腔嵴间腔DNADNA基粒基粒外膜外膜内膜内膜核糖体核糖体嵴嵴嵴内腔嵴内腔嵴内腔嵴内腔基质基质基质颗粒基质颗粒线粒体的超微结构线粒体的超微结构膜间腔嵴内腔嵴间腔基粒抑制剂可溶性的ATP酶寡酶素敏感蛋白（OSCP）HP蛋白线粒体内含亚铁原卟啉的蛋白主要包括：铁硫蛋白、辅酶Q、细胞色素等；ATP合酶、过氧化氢酶、过氧化物酶、单胺氧化酶、血红素加氧酶、NAD（P）H氧化酶、鸟氨酸氧化酶、一氧化氮合成酶、腺苷酸激酶、细胞色素氧化酶、苹果酸还原酶等120余种酶类。在病理情况下，亚铁原卟啉从细胞蛋白析出，成为细胞游离亚铁原卟啉，不仅没有生物学功能，反而能引起细胞和组织器官的氧化损伤。细胞游离亚铁原卟啉（FH）生成机制【细胞能量代谢重编程】ATPADP肌酸磷酸肌酸~P~P机械能(肌肉收缩)渗透能(物质主动转运)化学能(合成代谢)电能(生物电)热能(维持体温)生物体内能量的储存和利用都以ATP为中心。糖脂肪蛋白质葡萄糖脂酸+甘油氨基酸乙酰CoATAC2H呼吸链H2OADP+PiATPCO2Ⅰ：分解Ⅱ：氧化分解Ⅲ：氧化磷酸化•线粒体有氧葡萄糖葡萄糖丙酮酸乳酸缺氧乳酸转运蛋白乙酰辅酶A三羧酸循环H2OCO2ATP诺贝尔奖获得者德国生物化学家奥托.海因里希.瓦博格（OttoHeinnichWarburg）发现肿瘤细胞的耗糖速度是正常细胞的10倍，却仅产生1/10的能量。肿瘤细胞主要通过磷酸戊糖途径产能，使即便在有氧情况下有氧氧化过程也不能对糖酵解产生抑制，这称为瓦博格氏效应（Warburgeffect）。以以6-6-磷酸葡萄糖开始，在磷酸葡萄糖开始，在6-6-磷酸葡萄糖脱氢磷酸葡萄糖脱氢酶催化下形成酶催化下形成6-6-磷酸葡萄糖酸，进而代谢生成以磷酸葡萄糖酸，进而代谢生成以磷酸戊糖为中间代谢物的过程，称为磷酸戊糖途磷酸戊糖为中间代谢物的过程，称为磷酸戊糖途径，简称径，简称PPPPPP途径。途径。反应部位：胞浆重要反应产物：NADPH、5-磷酸核糖限速酶（启动因子）：6-磷酸葡萄糖脱氢酶6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性与抑癌基因p53有关。p53基因因编码一种分子质量为53kDa的蛋白质而得名，是一种抑癌基因。一旦p53基因发生突变，P53蛋白失活，细胞分裂失去节制，发生癌变。在正常情况下,p53与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶相结合,抑制它的活性，阻止磷酸戊糖途径进行,细胞中的葡萄糖主要通过三羧酸循环产生能量。在p53发生突变或缺失的肿瘤细胞中,失去了对葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的抑制,该酶作为戊糖磷酸途径的启动因子，使葡萄糖通过戊糖磷酸途径代谢。1、耗能；2、产生大量还原型辅酶Ⅱ（NADPH）,进行生物合成；3、改变细胞微环境。致癌因素阻抑蛋白p53葡萄糖-6-磷酸脱氢酶P53突变突变的p53葡萄糖-6-磷酸脱氢酶葡萄糖-6-磷酸脱氢酶激活启动因子葡萄糖戊糖磷酸代谢途径TACNADPH果糖-6-磷酸3-磷酸甘油醛二氧化碳抑制Warburg效应形成的细胞微环境紊乱低氧（氧稳态紊乱）酸性环境（酸碱平衡紊乱）还原性状态（氧化-还原平衡紊乱）FH位于细胞含亚铁原卟啉蛋白的肽链靠近表面的一个疏水核内，它主要依靠Fe2+与F8His的咪唑氮配位而挂在Pr链上。但是它之所以能固定在蛋白质的固定位置上而且取向一定，主要是因为还有大约21个残基逼近FH，距离在4A°之内，这些残基中有60多处与FH比较靠近，可以发生极性与非极性的相互作用，足以保持FH在细胞蛋白中的位置。FH的极性部分丙酸基侧链伸向亲水的表面，在生理pH下解离成负离子，在α链中，有一个丙酸基与CD3His相连；在β链中，FH的两个丙酸基分别与CD3Ser和E10Lys相连。FH与肽链之间的静电引力对于维持FH在细胞含亚铁原卟啉蛋白中的位置有很大作用。谷胱甘肽过氧化物酶以还原型谷胱甘肽(GSH)作为供氢体来分解H2O2，生成氧化型谷胱甘肽(GSSG)，使细胞内GSH:GSSG的比率...
