生物分离与纯化VIP免费

第十三章生物物质的分离与纯化1、培养液的预处理2、培养液的固液分离3、细胞的破碎4、生物物质的分离纯化方法5、生物分离工艺介绍教学内容补充内容（一）发酵醪(发酵液)的一般特征利用微生物发酵生产各种发酵产品，由于菌种不同和发酵醪特性不同，其预处理方法和提取、精制方法的选择也有差异。应针对发酵醪的特性来合理选择处理方法，大多数发酵产物存在发酵醪中，也有少数发酵产物存在菌体中，或发酵醪和菌体都含有，例如四环类抗生素。各种发酵产物无论在发酵醪或是在菌中体现往往浓度较低，并与种种的溶解和悬浮的杂质混在一起，要分离提纯发酵产物，首先要针对发酵醪的特性进行预处理。发酵醪的特性一般可归纳为：1、发酵醪大部分是水，一般含量达90%-99%.2、发酵醪中发酵产物浓度较低，尽管由于菌种、原料、工艺条件不同，发酵产物于发酵醪中浓度的高低也有差异，但总的来说发酵醪中发酵产物浓度都是比较低的，除了酒精、柠檬酸、葡萄糖酸等发酵产物浓度在10%以上外，其余的都在10%以下，而抗生素的浓度更低，一般在1%以下。3、发酵醪中的悬浮固体物主要含有菌体和蛋白质胶状物。由于发酵醪中存在一定数量的菌体和蛋白质胶体物质，不仅使发酵醪粘度增加，不利于过滤，而且增加提取和精制后工序的操作困难，在浓缩过程中变得更粘稠，同时容易产生泡沫。采用溶媒萃取法提炼时，蛋白质的存在夺产生乳化，使溶媒相和水相分层困难；采用离子交换法提炼时，蛋白质的存在也会增加树脂的吸附量，加重树脂的负担。4、发酵醪的培养基残留成分中还含有无机盐类，非蛋白质大分子其降解产物对提取和精制均有一定的影响。5、发酵醪中除了发酵产物外，常有其他少量的代谢产物。发酵过程中除了主代谢产物外，尚伴有一些其他的副代谢产物。这些少量的副产物，有时其结构特性与发酵主产物极为近似，这就会给分离提纯操作带来困难。6、发酵醪中还含有色素、热原质、毒性物质等有机杂质。尽管它们的确切组成还不十分明了，但它们对提炼影响相当大。为了保证发酵产品的质量和卫生标准，应通过预处理将色素、热原质、毒性物质等有机杂质先除去。发酵成熟醪中常含有各种样的杂质，而所需要的发酵产物则含量很少。因此，要获得纯净的发酵产物，它的提取与精制过程便成为一个复杂而必不可少的工艺过程。提取和精制的目的在于从发酵液中制取高纯度的、合符质量标准要求的发酵成品。尽管由于菌种、发酵醪的特征及发酵工艺的不同，发酵产物可以多种多样，但从工业发酵范畴来看，从发酵醪中获得产物大致可分为三类：发酵产物的分类补充内容（二）菌体主要以菌体细胞作为发酵产品，如单细胞蛋白、面包酵母、饲料酶母等。此外就是从菌体细胞中提取有用的发酵产物，如由酵母细胞提取辅酶A、核糖核酸等产品。有的抗生素主要存在于菌丝体中，如灰黄霉素产生菌在发酵过程中所产生的灰黄霉素主要在菌丝中，因此，也要从菌丝体中进行提取。酶发酵产物为酶制剂，包括胞外酶和胞内酶。如α-淀粉酶、β-淀粉酶、异淀粉酶、葡萄糖异构酶、葡萄糖氧化酶、右旋糖酐酶、蛋白酶、纤维素酶、果胶酶、转化酶、蜜二糖酶、柚苷酶、花青素酶、脂肪酶、凝乳酶、氨基酰化酶、天冬氨酸酶、青霉素酰胺酶、磷酸二酰酶、天冬酰胺酶等，均在工业上和医药上发挥作用。代谢产物中间代谢产物包括醋酸、乳、柠檬酸、葡萄糖酸、衣康酸及延胡索酸等。氨基酸发酵产物包括谷氨酸、赖氨酸、色氨酸等。由于对菌种的变异和氨基酸代谢机理的研究日益深入，所以其他氨基酸，除蛋氨酸、胱氨酸、半胱氨酸外，18种氨基酸均可用直接发酵法制造。有机溶剂发酵产物包括酒精、丙酮、丁醇等。核苷酸类物质发酵产物包括肌苷、肌苷酸以及鸟苷酸等。5`-肌苷酸和5`-鸟苷酸均为呈味核苷酸，核酸的微生物包括辅酶A、ATP、辅酶I等均为重要的医药品。抗生素发酵产物包括青霉素、链霉素、四环素、土霉素、金霉素、庆大霉素、新霉素、红霉素及利福霉素等。多糖发酵产物包括右旋糖酐及多糖B-1459等。多糖是医药和工业上重要粘性物质来源之一，右旋糖酐经过部分水解后供代血浆用。多糖B-1459是水溶性、高分子量的胞外异多糖。维生素发酵产物有核黄素、维生素C和维生素B12....