【专题二】2.3分解纤维素的微生物的分离VIP免费

酶筛选操作结果延伸酶筛选操作结果延伸教学目标:1、知道纤维素酶的种类及作用2、初步掌握从土壤中分离出分解纤维素的微生物的实验方法酶筛选操作结果延伸阅读课本27页基础知识部分第一、二段，回答下列问题：1、纤维素在生物圈的分布状况？2、纤维素酶的组成及作用？纤维素(C6H10O5)n是地球上含量最丰富的多糖类物质。植物的根、茎、叶等器官都含有大量的纤维素。其中棉花是自然界中纤维素含量最高的天然产物。复合酶，三种组分:CX酶、C1酶和葡萄糖苷酶，一、纤维素和纤维素酶纤维素纤维二糖葡萄糖C1酶、Cx酶葡萄糖苷酶酶筛选操作结果延伸草食性动物是怎样消化食物中纤维素的？自然环境中存在分解纤维素的微生物，在草食性动物等的消化道内，也共生有分解纤维素的微生物，其原理也是产生纤维素酶而分解纤维素，而人没有分解纤维素的能力。酶筛选操作结果延伸在2支20mL的试管中，分别放入1×6cm的滤纸条，再分别加入pH为4.8、物质的量浓度为0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液10mL、11m，在加入10mL缓冲液的试管中加入1mL纤维素酶（70~80U/mL）。将二支试管固定在50mL的锥形瓶中，在摇床上以140r/min的转速振荡反应1h，观察结果。1U表示1个酶活力单位，是指在温度为25℃，其他反应条件，如pH等，均为最适的情况下，在1min内转化1mmol的底物所需的酶量。底物：酶所作用和催化的化合物。小实验酶筛选操作结果延伸回答下列问题：2、纤维素分解菌的筛选方法1、纤维素分解菌的筛选方法的原理刚果红染色法：这种方法能够通过颜色反应直接对微生物进行筛选刚果红是一种染料，它可以与纤维素形成红色复合物，但并不和纤维二糖、葡萄糖发生这种反应。当纤维素被纤维素酶分解后刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解为中心的。这样我们可以通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌透明圈二、纤维素分解菌的筛选酶筛选操作结果延伸酶筛选操作结果延伸刚果红染色法方法一：先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应方法二：在倒平板时就加入刚果红思考：这两种方法各有哪些优点与不足？酶筛选操作结果延伸方法一：方法二：步骤培养基经涂布培养长出菌落→覆盖1mg/mL的CR溶液→(10~15min后)倒去CR溶液→加入1mol/L的NaCl溶液→15min后倒掉NaCl溶液→出现透明圈配置10mg/mL的CR溶液→灭菌→按照1mLCR溶液/200mL培养基的比例混匀→倒平板→接种后培养→出现透明圈优点显示出的颜色基本上是纤维素分解菌的作用操作简便，不存在菌落的混杂问题缺点操作繁琐，加入刚果红会使菌落之间发生混杂①由于产生淀粉酶的微生物也形成透明圈，所以可能产生假阳性反应。②有些微生物具有降解色素的能力，他们在培养过程中也会形成明显的透明圈，与纤维素的分解菌不易区分。两种刚果红染色法的比较：酶筛选操作结果延伸方法一中NaCl溶液的作用？思考：漂洗作用，洗去与纤维素结合不牢的刚果红，以免出现的透明圈不够清晰。用这方法可以判断酶活力的大小，实际上刚果红是结合到培养基的多糖底物，但分解纤维素的细菌可以产生纤维素酶，能分解这个多糖底物成为单糖，这样刚果红就不能结合上去了，氯化钠溶液就可以使结合不牢的刚果红洗去，这样就留下大大小小的透明圈，大的透明圈当然分解纤维素的能就强！酶筛选操作结果延伸练一练：1、下列关于纤维素酶的说法，错误的是A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖2、利用刚果红法可以筛选出纤维素分解菌，下列说法错误的是A、刚果红能与纤维素形成红色复合物B、刚果红能与纤维二糖形成红色复合物C、刚果红不能与葡萄糖形成红色复合物D、若培养基上产生了透明圈，则说明已筛选出了纤维素分解菌酶筛选操作结果延伸三、实验操作土壤取样选择培养*梯度稀释将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上挑选产生透明圈的菌落酶筛选操作结果延伸土壤取样取样的环境是怎样的，作出这种选择的理由是什么？选择纤维素丰富的环境，如树林中多年落叶形成的腐殖土，多年积累的枯枝败叶等等。生物与环境的互相依存关系，在富含纤维素的环境中纤维素分解菌的含量相...