血涂片评价和分类计数的质量控制流程血涂片评价血涂片的显微镜检查是血液细胞学检查的基本方法,临床上应用极为广泛,制备薄适宜,分布均匀,染色良好的血涂片是血液学检查的重要基本技术之一
一、血涂片制作取末梢血1滴,置载玻片一端,取另一边缘光滑的推片,放在血滴前面慢慢后移,接触血滴后稍停
血液即沿推片散开,将推片与载片保持30~45°角,向前平稳均匀推动推片,载片上便留下一层薄血膜
血涂片制成后,立即在空气中挥动,使其迅速干燥,以免血细胞变形
血膜干燥后,用铅笔在血膜的一侧写上病人姓名或编号
一张良好的血片,厚薄要适宜,头体尾要明显,细胞分布要均匀,膜的边缘要整齐,并留有一定的空隙
涂片时血滴愈大,角度愈大,推片速度愈快则血膜愈厚,反之血膜愈薄
太薄的血膜片50%的白细胞集中于边缘或尾部,血涂片过厚,细胞重叠缩小均不利于白细胞分类计数
如果血膜分布不匀,主要是推片不整齐,用力不均匀,载片不清洁所致
二、血涂片的质量控制1、血膜片的质量要求是厚薄均匀适度,低倍镜下观察全片,细胞不重叠,头尾及两侧有一定的空隙,血膜头部有明确的病人标志
2、一些体积较大的特殊细胞常在血膜的尾部出现,因此蜡笔划线时应注意保存血膜尾部细胞,血膜必须充分干燥,否则在染色过程中容易脱落
3、配制染料须用优质甲醇,稀释染液用缓冲液,因为缓冲液的pH对细胞染色的影响很重要
在偏酸性环境中正电荷增多,在偏碱性环境中负电荷增多,又因为细胞着色对氢离子浓度十分敏感
如果染色偏碱,原是紫红色的中性颗粒则染成深蓝色,造成识别困难
冲洗须用中性水,虽亦可用自来水(但不能保持稳定)
4、对所用染液应进行预染试验,新配制的染液放置一段时间后其中的美蓝逐渐氧化成天青B,天青B对细胞核的着色效果比美蓝好,因此,瑞氏染液放置时间越长染色效果越好,临床上称之为成熟
判断染液成熟程度的简易方法是用正常优质血片做预染试验,先用低倍镜观察载有染