2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com11细菌内毒素检查法干扰试验讲解董光宴湛江博康海洋生物有限公司2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com22实验基本流程图供试品限值确定最大有效稀释倍数确定供试品干扰实验正式实验结果判断2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com33供试品新化合物或新药建立细菌内毒素检查方法时，常常会遇到各种各样的困难，尤其是尚处于新药研发早期阶段的药物，由于药物制剂、赋形剂等还不稳定，经常会发生变化，这样就给方法的建立带来不同程度的影响。2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com44供试品在建立细菌内毒素检查法之前，应尽可能多的收集有关该药品的基本信息，例如：有关样品的溶解性信息，推荐的稀释液，在水中的溶解度，以及最适溶剂；样品的pH范围；分子量大小；产品规格、体积或重量；拟用于临床的用法和用量等等。2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com55限值的确定1、依据2010年版《中国药典》附录“细菌内毒素检查用水”2010年版《中国药典》二部附录“化学药品注射剂安全性检查法应用指导原则”2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com66干扰试验•当进行新药的内毒素检查试验前，或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查法时，须进行干扰试验。当鲎试剂、供试品的处方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。——2010版药典2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com77干扰试验•药典中已有规定的品种或有其他内毒素检验标准的品种，可直接进行内毒素检查，如在检验中出现干扰的情况需再进行干扰实验的验证；其他未建立内毒素检查的品种需先进行干扰实验，确定不干扰浓度后再进行内毒素检查。——2010版《中国药品检验标准操作规范》2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com88干扰试验•干扰实验的目的是确定供试品在多大的稀释倍数或浓度下对内毒素和鲎试剂的反应不存在干扰作用，为能否使用细菌内毒素检查法提供依据。并且验证当供试品的配方和工艺有变化，鲎试剂来源改变或供试品阳性对照结果呈阴性时供试品是否存在干扰作用。——2010版《中国药品检验标准操作规范》2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com99干扰试验•由于干扰实验检验的是在供试品存在的情况下内毒素与鲎试剂的反应是否正常，与所使用鲎试剂的灵敏度无关，因此在干扰实验中原则上可使用任一灵敏度的鲎试剂。但建议使用较低灵敏度（如0.50或0.25EU/ml）的鲎试剂，可尽量避免供试品所含的内毒素对干扰实验造成的阳性影响。——2010版《中国药品检验标准操作规范》2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六1010博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com举例:1试剂和样品鲎试剂（生产单位：湛江博康海洋生物有限公司，灵敏度：0.25EU/ml）细菌内毒素检查用水细菌内毒素工作标准品（中检所提供）西咪替丁氯化钠注射液（【规格】50ml:西咪替丁0.2g与氯化钠0.45gP258）2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六1111博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com2限值的确定内毒素限值L=0.50EU/ml（2010年版《中国药典》二部正文258页）。2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六1212博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com3干扰试验浓度的计算按照中国药典2005年版提供的公式计算最大有效稀释倍数，计算方法如下：3.1选用灵敏度为：0.25EU/ml时：MVD=CL/λ=1×0.5/0.25=2倍3.2选用灵敏度为：0.125EU/ml时：MVD=CL/λ=1×0.5/0.125=4倍2024年12月28日星期六2024年12月28日星期六博康www.zj-hy.com博康www.zj-hy.com13134预试验4.1目的初步确定供试品的最大不干扰浓度（当限值以EU/mg或EU/U表示）或最小不干扰稀释倍数（当限值以EU/ml表示）,为正式干扰试验提供依据。优点：减少摸...
