β-防御素-3在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌呼吸机相关性肺炎大鼠肺组织中的VIP免费

β-防御素-3在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌呼吸机相关性肺炎大鼠肺组织中的表达1华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科，武汉430022武庆平桂平姚尚龙【摘要】目的研究大鼠耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）呼吸机相关性肺炎（VAP）时肺组织中β-防御素-3（BD-3）的表达，以探讨其在VAP发病机制中的作用。方法20只清洁级雄性SD大鼠随机分为2组（n=10），非通气肺炎组（N组）和呼吸机相关性肺炎组（V组）。N组大鼠经口气管插管后立即接种2×109菌落形成单位（cfu）的MRSA，V组大鼠经口气管插管并进行4h保护性机械通气后气管内接种相同数量的细菌。接种后48h处死大鼠，测定肺湿重与体重比（WW/BW），记录肺肉眼和病理学评分，并进行肺组织细菌计数和脾培养，免疫组化检测肺组织BD-3的表达。结果与N组比较，V组WW/BW，肺病理学积分，肺组织细菌含量和菌血症发生率均显著升高（P均<0.01），而BD-3的表达显著降低（P<0.01）。结论耐甲氧西林金黄色葡萄球菌呼吸机相关性肺炎（MRSAVAP）显著重于非通气肺炎，这可能与机械通气降低了BD-3的表达有关。【关键词】耐甲氧西林金黄色葡萄球菌；呼吸机相关性肺炎；防御素Expressionofbeta-defensin-3inlungsofratswithmethicillin-resisitantStaphylococcusaureusventilator-associatedpneumoniaGUIPingDepartmentofAnesthesiology,UnionHospital,TongjiMedicalCollege,HuazhongUniversityofScienceandTechnology,Wuhan430022,China[Abstract]ObjectiveTostudytheexpressionofbeta-defensin-3(BD-3)inlungsofratswithmethicillin-resisitantStaphylococcusaureus(MRSA)ventilator-associatedpneumonia(VAP)andtoinvestigatetheroleofBD-3inthepathogenesisofVAP.Twentyspecificpathogen-freemaleSprague-Dawleyratsweighing242～286gwererandomlydividedinto2groups:nonventilatedpneumoniagroup(groupN,n=10)andventilator-associatedpneumoniagroup(groupV,n=10).RatsingroupNwereinfectedintrabronchiallywith2×109colony-formingunits(cfu)MRSAimmediatelyafteroralintubationwhileratsingroupVwereinfectedintrabronchiallywiththesameamountofMRSAafteroralintubationand4hours,protectivemechanicalventilation.Ratsfrombothgroupswerekilled48hafterinoculation.Lungwetweight1作者单位：430022武汉，华中科技大学同济医学院附属协和医院麻醉科tobodyweightratios(WW/BW)weremeasured,lungmacroscopicandmicroscopicscoreswererecorded,lungbacterialcountsandspleenculturewerealsodone.ExpressionofBD-3inlungofratswasdetectedbyimmunohistochemistrystaining.ResultsWW/BW,lungmicroscopicscore,bacterialpulmonaryconcentrationandtheincidenceofbacteremiaingroupVweresignificantlyhigherthaningroupN(P<0.01),whileexpressionofBD-3wassignificantlylowerthaningroupN(P<0.01).ConclusionVentilator-associatedpneumoniaismoreseverethannonventilatedpneumonia，thismayberelatedtothereducedexpressionofBD-3bymechanicalventilation.[Keywords]methicillin-resisitantStaphylococcusaureus;pneumonia,ventilator-associated;defensin呼吸机相关性肺炎（VAP）是重症监护室最重要的感染并发症，接受机械通气的病人8%-28%会并发VAP，其死亡率高达24%-50%[1]。VAP治疗失败率如此之高的原因之一就是多重耐药病原体的感染，耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）是VAP常见的多重耐药病原体[2]。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌呼吸机相关性肺炎（MRSAVAP）已成为重症监护室里的一大挑战。β-防御素-3（BD-3）是β－防御素家族中的一个成员，是上皮细胞分泌的一种重要的固有免疫效应分子，具有广谱高效的抗微生物活性，包括多重耐药的金黄色葡萄球菌，BD-3还能趋化单核细胞[3]。本实验拟建立MRSAVAP的大鼠模型，观察BD-3表达的变化，探讨BD-3在MRSAVAP发病机制中的作用。材料与方法MRSA临床分离株（华中科技大学同济医学院附属同济医院检验科）；蛋白胨、酵母粉、琼脂粉（Oxoid公司，英国）；小鼠抗人BD-3单克隆抗体（immundiagnostik公司，德...