食用菌学报�2007.14(3):62~66收稿日期:2007-08-10原稿;2007-08-27修改稿基金项目:福建省自然科学基金项目�虎奶菇抑菌活性物质的研究�(B0310024)和福建省财政专项�福建省农业科学科技创新团队建设基金�(STIF-Y01)的部分研究内容作者简介:林陈强(1979-),男,2002年毕业于中国农业大学食品学院食品科学与工程专业,学士,研实,主要从事食用菌活性成分研究,发表主笔论文2篇。*本文通讯作者文章编号:1005-9873(2007)03-0062-05虎奶菇抑菌物质与食品防腐剂抑菌活性的比较林陈强,林戎斌,蔡海松,郑永标,林新坚,陈济琛*(福建省农业科学院土壤肥料研究所,福州350013)摘�要:分别以几种细菌、酵母菌和霉菌为指示菌,比较了虎奶菇发酵液乙酸乙酯提取物与苯甲酸、山梨酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、乳酸链球菌素和钠他霉素等几种食品防腐剂的抑菌能力。结果表明,虎奶菇发酵液的乙酸乙酯提取物对几种细菌指示菌均有较好抑制作用,尤其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),大肠杆菌(Escherichiacoli),蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus)和肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis)的抑制效果都显著高于其它防腐剂;对白色念珠菌(Candidaalbicans)和啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)的抑制作用仅次于钠他霉素;对黄曲霉(Aspergillusflavus)和黑曲霉(Aspergillusniger)的抑制效果较差;对金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、蜡样芽孢杆菌、大肠杆菌、肠炎沙门氏菌和绿浓杆菌的最小抑菌浓度分别为1.250mg/mL、1.250mg/mL、2.500mg/mL、5.000mg/mL、5.000mg/mL和10.000mg/mL。关键词:液体发酵;乙酸乙酯提取物;抑菌中图分类号:S646.140.1;TS201.6����文献标识码:A��虎奶菇[Pleurotustuber-regium(Fr.)Sing]隶属担子菌亚门﹑层菌纲、伞菌目、侧耳科、侧耳属,是一种产于亚洲热带地区的珍稀药用菌,在中国主要分布于云南省的腾冲﹑章凤等地[1]。虎奶菇菌丝及其发酵液具有抑菌活性,特别是对一些革兰氏阳性菌具有较强的抑制作用[2,3]。苯甲酸、山梨酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、乳酸链球菌素和纳他霉素等都是目前比较常用的食品防腐剂,它们的抑菌谱较广并对多数腐败菌具有抑制作用[4]。我们用平板打孔法比较虎奶菇发酵液乙酸乙酯提取物与苯甲酸、山梨酸、苯甲酸钠、山梨酸钾、乳酸链球菌素和纳他霉素的抑菌能力,为开发虎奶菇抑菌物质作为生物防腐剂提供参考依据。现将试验结果报道如下。1�材料与方法1.1菌种��虎奶菇(Pleurotustuber-regium),引自福建三明真菌研究所。1.2指示菌��细菌:金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus),枯草芽孢杆菌(Bacillussubtilis),大肠杆菌(Escherichiacoli),蜡样芽孢杆菌(Bacilluscereus),肠炎沙门氏菌(Salmonellaenteritidis),绿浓杆菌(Pseudomonasaeruginosa)。酵母菌:白色念珠菌(Candidaalbicans),啤酒酵母(Saccharomycescerevisiae)。霉菌:黑曲霉(Aspergillusniger),黄曲霉(Aspergillusflavus)。以上菌种由福建省疾病预防控制中心和福建师范大学提供。1.3培养基��液体菌种培养基:黄豆粉10g,葡萄糖20g,蒸馏水1000mL,pH自然。液体发酵培养基:黄豆粉15g,甘露醇25g,蒸馏水1000mL,pH自然。PDA斜面培养基:马铃薯200g,葡萄糖第3期林陈强,等:虎奶菇抑菌物质与食品防腐剂抑菌活性的比较20g,琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH7.0。牛肉膏-蛋白胨斜面培养基:牛肉膏5g,NaCl5g,蛋白胨10g,蒸馏水1000mL,pH7.2。水琼脂培养基:琼脂20g,蒸馏水1000mL,pH7.0。1.4实验方法1.4.1虎奶菇液体菌种制备250mL三角瓶装100mL液体菌种培养基,高压湿热灭菌(0.1MPa,121�,20min),接斜面菌种(1cm�1cm)两块,160r/min摇床30�培养7d。无菌条件下取菌球,用研钵磨碎,加入含有玻璃珠的无菌水60mL震荡,使其在无菌水中均匀分布,制成液体菌种。1.4.2虎奶菇发酵液制备[3,5]250mL三角瓶每瓶装80mL液体发酵培养基,0.1MPa,121�灭菌20min;接入液体菌种,接种量V�V=1�100,160r/min摇床30�培养6d,发酵液过60目筛,5000r/min离心,取上清液备用。1.4.3样品制备发酵液乙酸乙酯提取物:上清液65�真空浓缩至原体积的1/3,5000r/min离心,取上清液,用乙酸乙脂萃取4次,酯相减压浓缩至恒重作为提取物�,用25%甲醇稀释...
