实验四-4pH对淀粉酶活性的影响一、实验目的了解pH对酶活性的影响及最适pH的定义
二、原理酶的催化活性与环境pH有密切关系,通常各种酶只在一定pH范围内才具有活性,酶活性最高时的pH,称为酶的最适pH,高于或低于此pH时酶的活性都逐渐降低
不同酶的最适pH不同
酶的最适pH不是一个特征性的物理常数,对于一个酶,其最适pH因缓冲液和底物的性质不同而有差异
三、试剂和器材1
3%氯化钠的0
5%淀粉溶液、新鲜唾液、0
2mol/L磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、碘化钾-碘溶液2
器材恒温水浴锅四、操作步骤1
取3个锥形瓶,按下表的比例吸取磷酸氢二钠溶液和柠檬酸钠溶液,制备pH为5
0的三种缓冲溶液
2mol/L磷酸氢二钠(mL)0
1mol/L柠檬酸缓冲液pH1235
另取3只干净试管,按下表操作
试管编号试剂处理123pH5
0缓冲溶液/mL3--pHh6
8缓冲溶液/mL-3-pHh8
0缓冲溶液/mL--30
5%淀粉溶液/mL222每隔1min逐管加入唾液稀释液/mL222充分摇匀,置37℃水浴保温2min,到达保温时间后,每隔1min依次取出立即加碘化钾-碘溶液/滴222记录观察结果五、注意事项1
本实验中的保温时间是2min,但实际是随不同的唾液淀粉酶的活性而变化的,所以在实验前先找出准确的保温时间是本实验的关键;2
加入酶液后务必充分摇匀,保证酶与全部淀粉溶液接触,反应才能得到理想的颜色梯度变化结果
六、思考题1
pH值导致酶活性丧失的分子机理是什么
pH值改变导致的活性丧失,pH值恢复后活性也能恢复吗