毛细管区带电泳检测磷霉素的杂质谱VIP免费

.765.收稿日期：2011-02-10作者简介：刘浩，男，生于1968年，博士，主任药师，主要从事药物分析研究。E-mail:liuhao1968@hotmail.com；刘畅，ccchangchang@hotmail.com文章编号：1001-8689(2011)10-0765-07中国抗生素杂志2011年10月第36卷第10期毛细管区带电泳检测磷霉素的杂质谱刘浩刘畅(上海市食品药品检验所，上海201203)摘要：目的采用毛细管区带电泳(CZE)-间接紫外检测技术检测磷霉素的杂质谱。方法在CZE系统中采用同时含阳离子探针和阴离子探针的背景电解质，分别为无光吸收特征的阳离子组分和阴离子组分提供背景吸收并同时检测和筛查，以便得到磷霉素较为完整的杂质谱；为证实分离系统的专属性和有效性，分别采用杂质对照品、半制备HPLC和梯度洗脱HPLC-电喷雾离子阱质谱对杂质谱中的主要杂质进行了确认。结果采用该方法可将国外药典的HPLC系统难以分离的杂质与磷霉素分离，可从磷霉素的粗品中可分离出7个已知杂质和至少19个未知杂质，可检测在HPLC系统中难以检测的磷霉素的强保留杂质。结论该方法可应用于磷霉素的杂质谱检测。关键词：毛细管区带电泳；杂质谱；磷霉素中图分类号：O657.7，R978.1+1文章标识码：AImpurityprofilingoffosfomycinbycapillaryzoneelectrophoresisLiuHaoandLiuChang(ShanghaiInstituteforFoodandDrugControl,Shanghai201203)AbstractObjectiveAcapillaryzoneelectrophoresis(CZE)methodwasestablishedtodetecttheimpurityprofileoffosfomycin.MethodsInordertoobtainfullimpurityprofile,abackgroundelectrolytecontainingbothananionicprobeandacationicprobeinaCZEsystemwasusedtosimultaneouslydetectanionicionsandcationicionspossessingnochromophoreinfosfomycin.Impurityreferencestandards,semi-preparativeHPLC,andgradientHPLCelectrosprayiontrapmassspectrometrywereusedtoconfirmtheselectivityandvalidityoftheseparationsystem.ResultsUsingthenovelmethod,7knownimpuritiesandatleast19unknownimpuritiescouldbeseparatedfromarawsample,whilethepharmacopeiaHPLCmethodmightbedifficulttoseparatemostoftheseimpurities,especiallyforthestrongretainedimpurities.ConclusionThismethodcanbeusedfortheimpurityprofilingoffosfomycin.KeywordsCapillaryzoneelectrophoresis;Impurityprofile;Fosfomycin磷霉素是中国卫生部发布的“产NDM-1泛耐药肠杆菌科细菌感染诊疗指南(试行版)”建议的治疗超级细菌感染的6种非β-内酰胺抗菌药物之一。该药的不良反应发生率为10%~17%。近年来，随着临床应用范围的扩大，其不良反应呈增多趋势，且有些反应较为严重，以过敏性休克及过敏性休克而致死亡的报道居多。在抗感染药致过敏性休克中，与磷霉素有关的发生率居第4位[1-3]。已知抗生素中存在的高分子杂质(聚合物)可引发过敏反应[4]，其他杂质如工艺杂质和降解产物等也有可能导致不良反应的发生。因此，磷霉素的杂质谱检测在药品的质量控制中是非常必要的。磷霉素的亲水性较强且无光吸收特征，较难采用一般的分离分析方法控制其质量。现行英国药典分析质控与制剂.766.毛细管区带电泳检测磷霉素的杂质谱刘浩等采用氨基柱-HPLC-示差折光检测磷霉素氨丁三醇的杂质包括4个已知杂质：杂质A(磷霉素二醇物)、杂质B、杂质C和杂质D[5]。该系统所用流动相含有较高浓度的无机盐，且该检测器的平衡所需时间较长，导致稳定性较差的氨基柱可能在色谱系统完全平衡前即已损坏并降低分离能力；该检测器的灵敏度较低，因而样品溶液的浓度高达0.12g/mL，致使有关物质之间的分离较差，且可能有杂质包括副产物、降解产物、聚合物和中间体如顺丙烯磷酸(图1)等未被分离并检测；该方法未采用梯度洗脱，示差折光检测器也不适用于梯度洗脱，故可能有强保留的杂质未被检测出。磷霉素的杂质检测也可采用离子对HPLC-蒸发光散射检测(ELSD)技术[6]。但采用梯度洗脱时基线波动较大，强保留的杂质峰叠加在波动的基线上，难以识别和检测。将流动相中乙腈的浓度增加至约30%即可将强保留的杂质全部洗脱，唯杂质之间的分离较差；注射用磷霉素钠中添加的枸橼酸与个别未知杂质难以分...