选考章末检测卷(十三)第十三章现代生物科技专题1．(2016·10月浙江选考，节选)某小组欲进行烟草原生质体分离与培养的研究。请回答：(1)原生质体的分离：在无菌条件下，取烟草无菌苗的叶片，放入含有0.5mol/L甘露醇(维持较高渗透压)的________________混合液处理，经过离心纯化后获得原生质体。(2)原生质体的培养：将原生质体进行培养，重新长出细胞壁，形成胚性细胞。此时，应该____________培养基中甘露醇的浓度，以利于胚性细胞继续培养形成细胞团，然后经两条途径形成再生植株。途径一：细胞团经球形胚、__________和胚状体，最后发育成植株。途径二：细胞团增殖为愈伤组织，然后在发芽培养基上诱导出芽，切割芽经过生根后形成完整植株。上述发芽培养基中含量相对较高的激素是__________，胚性细胞的主要特点是__________(A.液泡小、细胞核小B．液泡大、细胞核大C．液泡大、细胞核小D．液泡小、细胞核大)(3)为了对烟草的某些性状进行改良，分离得到两种烟草的原生质体后，通过__________方法将它们的遗传物质组合在一起，经培养获得具有新性状的再生植株。提取再生植株的DNA，采用__________扩增相关基因，来鉴定遗传物质是否成功重组。【解析】(1)用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁，可分离获得原生质体。(2)原生质体的培养需要降低培养基中甘露醇的浓度，经过培养基成分的诱导，从单细胞依次形成细胞团、球形胚、心形胚和胚状体，最后再生出完整植株；再生植株也可由愈伤组织通过适量的生长素和细胞分裂素配比诱导芽的分化，通过适量的生长素及适当减除其它激素诱导生根，发芽培养基中相对较高的激素是细胞分裂素，生根培养基中相对较高的激素是生长素，胚性细胞的主要特点是：细胞核大，液泡小。(3)分离得到的两种烟草的原生质体，需要采用原生质体融合的方法将两者的遗传物质融合在一起，提取再生植株的DNA用来鉴定，需要采用PCR技术扩增。【答案】(1)纤维素酶和果胶酶(2)降低心形胚细胞分裂素D(3)原生质体融合PCR技术2．(2016·4月浙江选考，节选)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，现拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：(1)从兔肝细胞中提取mRNA，在__________酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成__________，再导入用氯化钙处理的__________，用此农杆菌侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是__________(A.叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽C．再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根D．愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。(2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于__________上，进行液体悬浮培养液。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是__________________，从而使叶片保持正常的形态。【解析】(1)以mRNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，这一过程需要在逆转录酶的催化下进行。获得目的基因后，需在限制性核酸内切酶和DNA连接酶的作用下，将目的基因与运载体(Ti质粒)连接形成重组DNA分子，再将其导入受体细胞。将目的基因导入植物细胞常用农杆菌转化法，先将重组DNA导入经氯化钙处理的农杆菌，再用导入目的基因的农杆菌感染植物细胞，最终将目的基因导入植物细胞内。导入目的基因的植物细胞经组织培养过程形成转基因植物。在组织培养过程中，叶片在含适宜浓度的生长素的培养基上脱分化形成愈伤组织，然后在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽，继而在生长素含量相对较高的培养基上生根，最后形成完整的植株，愈伤组织形成植株的过程中发生细胞的再分化。(2)植物组织培养过程中，将愈伤组织等细胞置于摇床上，进行液体悬浮培养，形成多个分散的细胞。培养过程中培养液一方面为植物细胞提供营养，另一方面维持一定的渗透压，从...
