第2课时动物细胞融合和单克隆抗体1.掌握动物细胞融合的原理、方法、过程与意义
2.掌握制备单克隆抗体的方法、过程和应用
(重、难点)知识点一|动物细胞融合1.含义:在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程
2.结果:形成杂种细胞,如鼠-鸡杂种细胞
3.促融方法(1)物理法:如离心、振荡、电场法
(2)化学法:如聚乙二醇作为诱导剂
(3)生物法:如仙台病毒作为诱导剂
4.应用:制备单克隆抗体
科学家经过长期的探索,终于实现了让不同种动物的体细胞进行杂交的设想,观察下图,图中有多个A细胞和B细胞
探讨:动物细胞融合的结构基础是什么
提示:细胞膜的流动性
探讨:若只考虑两两融合,则诱导细胞融合后可能形成几种融合细胞
融合后的细胞在遗传上有何特点
提示:①三种融合细胞,即同种细胞融合(两种)和不同种细胞融合(一种)
②特点:具有两个细胞的遗传信息
探讨:经促融处理后的细胞是否均需进一步筛选
促融处理后,均会出现不同种融合细胞,所以需要对处理后的细胞进行筛选,选择出符合要求的杂交细胞
探讨:动物细胞完成融合的标志是什么
提示:动物细胞融合时,先是细胞膜发生融合,然后是细胞核的融合
当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞,则标志着动物细胞融合的完成
探讨:比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同
提示:二者都可以采用离心、振动、电场法等物理方法,或者使用化学试剂聚乙二醇进行促融,除上述方法外,动物细胞融合还可以采用灭活的病毒进行促融
1.动物细胞融合(1)操作步骤:细胞准备↓细胞融合:加促融因子于待融合的细胞之中,诱导融合↓杂种细胞选择:利用选择性培养基等,使亲本细胞死亡,而让杂种细胞存活↓杂种细胞克隆:对选出的杂种细胞进行克隆,经过培养,就能获得所需要的细胞(2)过程分析:细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合,其中细胞膜融合是细胞