第2课时动物细胞融合和单克隆抗体1．掌握动物细胞融合的原理、方法、过程与意义。2．掌握制备单克隆抗体的方法、过程和应用。(重、难点)知识点一|动物细胞融合1．含义：在一定的条件下将两个或多个动物细胞融合为一个细胞的过程。2．结果：形成杂种细胞，如鼠－鸡杂种细胞。3．促融方法(1)物理法：如离心、振荡、电场法。(2)化学法：如聚乙二醇作为诱导剂。(3)生物法：如仙台病毒作为诱导剂。4．应用：制备单克隆抗体。科学家经过长期的探索，终于实现了让不同种动物的体细胞进行杂交的设想，观察下图，图中有多个A细胞和B细胞。探讨：动物细胞融合的结构基础是什么？提示：细胞膜的流动性。探讨：若只考虑两两融合，则诱导细胞融合后可能形成几种融合细胞？融合后的细胞在遗传上有何特点？提示：①三种融合细胞，即同种细胞融合(两种)和不同种细胞融合(一种)。②特点：具有两个细胞的遗传信息。探讨：经促融处理后的细胞是否均需进一步筛选？提示：是。促融处理后，均会出现不同种融合细胞，所以需要对处理后的细胞进行筛选，选择出符合要求的杂交细胞。探讨：动物细胞完成融合的标志是什么？提示：动物细胞融合时，先是细胞膜发生融合，然后是细胞核的融合。当两个细胞核融合后形成具有单核的杂交细胞，则标志着动物细胞融合的完成。探讨：比较动物细胞融合与植物体细胞杂交所用的促融方法的异同。提示：二者都可以采用离心、振动、电场法等物理方法，或者使用化学试剂聚乙二醇进行促融，除上述方法外，动物细胞融合还可以采用灭活的病毒进行促融。1．动物细胞融合(1)操作步骤：细胞准备↓细胞融合：加促融因子于待融合的细胞之中，诱导融合↓杂种细胞选择：利用选择性培养基等，使亲本细胞死亡，而让杂种细胞存活↓杂种细胞克隆：对选出的杂种细胞进行克隆，经过培养，就能获得所需要的细胞(2)过程分析：细胞融合的过程包括细胞膜融合、细胞质融合和细胞核融合，其中细胞膜融合是细胞融合的先导，在细胞膜融合中体现出细胞膜具有一定的流动性。2．植物体细胞杂交与动物细胞融合的比较比较项目植物体细胞杂交动物细胞融合原理细胞膜的流动性、细胞的全能性细胞膜的流动性、细胞的增殖融合前处理先除去细胞壁先使细胞分散开使用的酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶诱导手段物理法：离心、电场法、振动化学法：聚乙二醇等试剂诱导除物理法和化学法外，也可用灭活的病毒诱导过程结果杂种植株杂交细胞应用培育植物新品种主要用于制备单克隆抗体意义克服了远缘杂交不亲和的障碍，打破了生殖隔离，扩展了杂交的亲本组合1．近几年神舟飞船频频成功发射和着陆。在飞船上，科学家进行了无人搭载的空间动物细胞融合实验。该实验所依据的原理和促进动物细胞融合时最常用的方法分别是()A．细胞的全能性、灭活的仙台病毒诱导融合B．细胞的全能性、电场法融合C．细胞膜的流动性、灭活仙台病毒诱导融合D．细胞膜的流动性、电场法融合【解析】不管是动物细胞融合，还是原生质体融合，都是利用了细胞膜具有流动性这一原理。动物细胞融合时最常用的诱导手段就是利用灭活的仙台病毒诱导。【答案】C2．下图所示为细胞融合技术的一些过程：(1)从A细胞和B细胞到C细胞的过程中，采用的方法中与诱导植物原生质体融合不同的是________处理。(2)若A、B细胞为单倍体烟草植物的体细胞，那么这样的细胞已经用酶降解脱掉了________。这种酶可能是________、________，由此生成的细胞经培养形成的细胞团称为________。(3)若A、B分别是基因型为Hhrr、hhRr两个烟草品种的花粉，且这两对基因分别位于两对同源染色体上。由于一对隐性纯合基因(rr或hh)的作用，在光照强度大于800lx时都不能生长。要想从融合细胞的培养液中分离出基因型为HhRr的杂种细胞，较为简便的筛选方法是____________________________。(4)若将基因型为AaBB的番茄细胞与基因型为AAbb的番茄细胞融合，由融合细胞培养成的愈伤组织细胞的基因型是____________。(5)若A、B分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则D细胞的特点是__________________。由D细胞产生的抗体与普通血清抗体相比较，具有____________________的特点。(6)若将染色体组成为2A＋XX的人细胞与染...
