第三节蛋白质工程1．简述蛋白质工程。2．举例说出蛋白质工程的应用。一、蛋白质的分子设计1．蛋白质工程的概念蛋白质工程就是根据蛋白质的精细结构和生物活性之间的关系，按照人类自身的需要，利用生物技术手段对蛋白质的DNA编码序列或直接对蛋白质进行有目的的改造，从而创造出自然界本不存在的、具有优良特性的蛋白质分子。2．蛋白质工程的基础蛋白质工程的基础是基因工程。所以蛋白质工程又叫第二代基因工程。思考通过基因工程生产的蛋白质是自然界已有的，能不能想办法让生物产生前所未有的、符合人们需要的蛋白质？提示：通过蛋白质工程可获得自然界不存在的、符合人们需的蛋白质。3．蛋白质的分子设计方法（1）小范围改造：对已知结构的蛋白质进行少数氨基酸的替换，从而改善蛋白质的性质和功能。（2）拼接组装：对不同来源的蛋白质进行拼接组装，期望转移相应的功能。例如，将编码一种蛋白质的部分基因移植到另一种基因上，经过基因表达，产生新的融合蛋白质。（3）蛋白质从头设计：从氨基酸的排列顺序出发，设计制造出自然界不存在的全新蛋白质，使之具有特定的空间结构和预期功能。二、蛋白质工程的应用1．提高蛋白质的稳定性对编码T4溶菌酶的基因进行改造，将T4溶菌酶第3位上的异亮氨酸改成半胱氨酸，使T4溶菌酶获得了较强的耐热特征。2．改变蛋白质的活性对t—PA进行改造后，进入血浆后不与纤溶酶原激活剂抑制物结合形成复合物，不失去活性。3．合成嵌合抗体保留鼠单克隆抗体的可变区，用人抗体的恒定区替换鼠单克隆抗体的恒定区。这种嵌合抗体在人体内抗原性显著下降，抗体的特异识别功能没有丧失。思考利用蛋白质工程改造或者设计制造出的人工蛋白质有哪些优点？提示：人工蛋白在活性、稳定性及抗原性等方面都优于天然蛋白质1．蛋白质工程与基因工程的比较蛋白质工程基因工程蛋白质合成自然界不存在的蛋白质合成天然存在的蛋白质实质改造基因将目的基因从供体生物转移到受体生物，并在受体生物中表达操作程序基本思路确定蛋白质功能→设计预期蛋白质结构→推测氨基酸序列→找到对应的脱氧核苷酸序列→人工合成目的基因具有相应生物功能的蛋白质遵循中心法则：DNA→mRNA→蛋白质→产生生物活性应用及现状主要集中在对现有蛋白质进行改造方面，目前真正成功的例子较少，原因是蛋白质的高级结构非常复杂，人们对此知之甚少已被广泛应用，转基因植物、动物以及药品生产等已商业化，但基因治疗仅处于临床试验阶段①二者都属于分子水平上的操作。②蛋白质工程的本质是通过改造基因进而形成自然界不存在的蛋白质，所以被形象地称为第二代基因工程。2．蛋白质工程是应怎样的需求而崛起的？在已研究过的几千种酶中，只有极少数可以应用于工业生产，绝大多数酶都不能应用于工业生产，这些酶虽然在自然状态下有活性，但在工业生产中没有活性或活性很低。这是因为在工业生产的每一步反应体系中常常会有酸、碱或有机溶剂存在，反应温度较高，在这种条件下，大多数酶会很快变性失活。提高蛋白质的稳定性是工业生产中一个非常重要的课题。一般来说，提高蛋白质稳定性的措施包括：延长酶的半衰期，提高酶的热稳定性，延长药用蛋白的保存期，抵御由于重要氨基酸氧化引起的活性丧失等。蛋白质工程的崛起主要是工业生产和基础理论研究的需要。而结构生物学对大量蛋白质分子的精确立体结构及其复杂的生物功能的分析结果，为设计改造天然蛋白质提供了蓝图。分子遗传学的以定点突变为中心的基因操作技术为蛋白质工程提供了手段。题型一设计蛋白质结构【例1】某多肽链的一段氨基酸序列是：…—甲硫氨酸—色氨酸—苯丙氨酸—色氨酸—…（1）怎样得出决定这一段肽链的脱氧核苷酸序列？请把相应的碱基序列写出来。（2）确定目的基因的碱基序列后，怎样才能合成或改造目的基因（DNA）?解析：蛋白质工程就是通过生物技术手段来研究、确定和改造蛋白质构造，以完善其功能，有目的地制备特定的蛋白质。由氨基酸序列知，翻译该蛋白质的mRNA的碱基序列为…—AUGUGGUUUUGG—…或…—AUGUGGUUCUGG—…。由mRNA的碱基序列可知转录产生mRNA的DNA分子的碱基序列。答案：（1）根据氨基酸序列反推mRNA碱基序列...
