第2节基因工程及其应用1
基因工程的原理是基因重组
2.基因工程的操作工具有限制酶、DNA连接酶和运载体
3.限制性核酸内切酶具有特异性,能识别特定的核苷酸序列,并在特定位点上切割DNA分子
4.DNA连接酶的作用是将目的基因和运载体连接成重组DNA分子
5.常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等
6.基因工程的四个步骤是:提取目的基因、目的基因与运载体结合、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定
基因工程的操作工具[自读教材·夯基础]1.基因工程的概念理解2.基因工程的操作工具(1)“剪刀”与“针线”:项目名称作用“剪刀”限制性核酸内切酶识别特定的核苷酸序列,并在特定的切点上切割DNA分子“针线”DNA连接酶连接脱氧核糖和磷酸之间的缺口(2)1.EcoRI限制酶只能识别GAATTC的序列,并在G和A之间将这段序列切开,产生黏性末端,请写出切割后产生的黏性末端
右图表示一段DNA序列,请确定限制酶和DNA连接酶的作用部位
提示:限制酶和DNA连接酶都作用于b部位
[跟随名师·解疑难]1.限制酶与DNA连接酶(1)限制酶:①作用特点:专一性和特异性
②作用结果:产生黏性末端
③作用部位:脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键
(2)DNA连接酶与DNA聚合酶的比较:比较项目DNA连接酶DNA聚合酶不同点作用对象连接DNA片段连接游离的脱氧核苷酸作用条件不需要模板需要模板相同点作用部位连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖2
运载体具备的条件(1)能在宿主细胞内稳定保存并大量复制——这是保证目的基因能在细胞分裂过程中复制并传递给子细胞的基础
(2)有多个限制酶切点——这是运载体能够接入多种目的基因所必备的条件
(3)有标记基因——这是检测目的基因是否导入受体细胞中的重要判断依据
基因工程的操作与应用[自读教材·夯基础]1.基本操作步骤2.应用应用内容作物育种目的培育出