酵母单杂交实验步骤总结VIP免费

□□□□□□□□□□□□□□□10D□□□□□□□□□□□3h叮口Ecoli叮叮叮叮叮叮pBait—AbAi叮叮叮叮叮叮叮叮叮叮□DNA□□□□□□□□□□□□□□□□1□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a□□□pAbAi□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a2□TEbuffer□□□□□100pmol/LD3□□□□□1:1□□□□□□□□□□□□□□□□a495°C叮30s叮叮叮叮572°C2minD25°C叮2mi6□□□□□□□□□□□□□□a-78□□□□□□100□□0.pmol/9□□□□□□□□□□□□□a1.0p!1.0pL1pBait-AbAi□□□□□□□□□□□□□□□pAbAi□□AbAir叮叮叮叮叮叮叮叮叮叮叮口20bp□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a□50pmol/L叮□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a□□1pLpAbAi□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□apAbAi□□□50ng/pLQannealedoligonucleotide□0.5pmol/LQ□□□10口T4DNAligasebufferBSAQ10mg/mLQNuclease-freeHO2T4DNAligase□400U/pLD□□□1.5pL0.5pL10.5pL0.5pL15pL1pLnuclease-freeHO□□□□□□□□□□2□□□□□□□□□□□□□a□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□PCR□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□PCR□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□PCR□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1Q□BstBI□□BbsI□□2p!pBait-AbAiQpMutant-AbAiDp53-AbAi□□□□□□URA3□□□□□□□□□□□□□□2D□MatchmakerYeastTransformationSystem2□□□□1pl□□□□□□□□YIHGold叮口□3D□□□□□□□□□1/10U1/100U1/1000叮叮叮叮叮叮口SD/-Ura□□□□□□3d□□□5□□□□□□MatchmakerInsertCheckPCRMix1□□PCR□□□□□□□□Y1HGold□□□□□□□□□□□4Q□PCR□□□25plPCR-gradeHOU2□5D□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□PCR-gradeHO□□□□□□□□□□□□2□10D□□□□□□□□□□□□□□YPDA□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□a-70°C叮口25pl25pl50pl□9D□□□□PCR□□□□□□p53-AbAi□□□□□□SD/-Ura□□□□4°C□□□□Y1HGold[Bait/AbAi]叮[p53□□□□1mL□□□□6Q□□□□□□□25plMatchmakerInsertCheckPCRMixDQDDDDQ□□PCRMMMMMMMatchmakerInsertCheckPCRMixH2O/yeast□□□□□□□□□□PCR95°C1min98°C10s’55°C30s68°C2min>□8D□5plPCR□□□□1%叮叮叮叮叮口□□□□□AbA□□□□URA3□□□Y1HGold□□□□□□□□□□□□1.4kb□□□PCR□□□□□□□□□□□□1.4kb□□□□□□□□□□□□□1.35kb+insertsize100ml□□□YPDA□50ml□□□75%DAbArURA3D4PCR叮pBait-AbAiDDDDD30cycles7D□□□3□□□□□□AbAr叮叮口□3D□□□□□□□□□□□AbA□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□pAbAi□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□p53-AbAi□□□□□aureobasidinA□□□□□100ng/mlQ□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□AbAr□3□□□□□□AbAr叮叮口□3D□□□□□□□□□□□AbA□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□1AbAr叮叮叮叮叮□□□□□□AbA□□□□□50-100ng/mLD□□□□□□□□□□□□□□□□□□200ng/mLAbA□□□□□□□□□□□□□□□AbA□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□□5Qfirst-strandbuffer2.0pl1000ng/mLQAbA□□□□□□RNAU□□□cDNAU□□□cDNA□□pGADT7—500—1000ng/m...