CN201110116141-高效液相色谱法检...-申请公开VIP免费

www.soopat.com注：本页蓝色字体部分可点击查询相关专利SooPAT高效液相色谱法检测蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱申请号：201110116141.6申请日：2011-05-06申请(专利权)人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号发明(设计)人刘静波常皓宫新统主分类号G01N30/36(2006.01)I分类号G01N30/36(2006.01)IG01N21/33(2006.01)I公开(公告)号102156174A公开(公告)日2011-08-17专利代理机构代理人(10)申请公布号CN102156174A(43)申请公布日2011.08.17CN102156174A*CN102156174A*(21)申请号201110116141.6(22)申请日2011.05.06G01N30/36(2006.01)G01N21/33(2006.01)(71)申请人吉林大学地址130012吉林省长春市前进大街2699号(72)发明人刘静波常皓宫新统(54)发明名称高效液相色谱法检测蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱(57)摘要一种磷脂酰胆碱的检测方法，采用高效液相色谱与紫外检测器联用的方法对蛋黄卵磷脂中的磷脂酰胆碱进行定性和定量，其特征是采用安捷伦公司ZORBAXRX-SIL(4.6mm×250mm，5μm)硅胶柱为分析柱，以甲醇/乙酸为流动相进行等度洗脱，其他洗脱条件为紫外检测波长为200nm，柱温30℃，进样量15μl，流速为0.5ml/min。该方法流动相采用二元体系，组成更加简单，加入的3.75％的乙酸溶液改善了磷脂酰胆碱的峰形，有效抑制了严重的拖尾现象。且流速较低，为0.5ml/min，节约了溶剂的使用成本。出峰时间较快，在14分钟以内。磷脂酰胆碱标准曲线的线性范围是10μg/ml～160μg/ml。经方法学验证性试验，证明本方法精密度、稳定性良好，准确度较高。(51)Int.Cl.(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页说明书4页附图3页CN102156177A1/1页21.一种磷脂酰胆碱的检测方法，采用高效液相色谱法与紫外检测器联用的方法对蛋黄卵磷脂中的磷脂酰胆碱进行定性和定量，其特征是以甲醇/乙酸二元体系为流动相进行等度洗脱，流速为0.5ml/min，紫外检测波长为200nm，磷脂酰胆碱标准曲线的线性范围为10μg/ml～160μg/ml。2.根据权利要求1所述的磷脂酰胆碱的检测方法，其特征是：采用ZORBAXRX-SIL纯硅胶色谱柱作为分析柱时，流动相为甲醇和0.2mol/L的乙酸水溶液，二者的体积比例为96.25∶3.75。3.根据权利要求1所述的磷脂酰胆碱的检测方法，其特征是：流动相的流速为0.5ml/min。4.根据权利要求1所述的磷脂酰胆碱的检测方法，其特征是：在高效液相-紫外检测器系统中，磷脂酰胆碱的最大吸收波长为200nm。5.根据权利要求1所述的磷脂酰胆碱的检测方法，其特征是：本方法采用外标法定量，磷脂酰胆碱标准曲线的线性范围是10μg/ml～160μg/ml。权利要求书CN102156174ACN102156177A1/4页3高效液相色谱法检测蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱技术领域[0001]本方法属于功能因子检测方法领域，涉及采用高效液相色谱法检测蛋黄卵磷脂中磷脂酰胆碱的方法。背景技术[0002]卵磷脂是一种含磷的极性脂类物质，通常指含磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇等不同磷脂组分的混合物。卵磷脂具有重要的营养保健功能。它是生物膜的重要成分，具有延缓衰老，调节脂肪代谢，预防心脑血管疾病，提高大脑活力，提高免疫力等作用，广泛的应用于食品、医药、化妆品、饲料、涂料、农业生产等领域。磷脂酰胆碱是卵磷脂中最重要的功能成分。目前对于大豆卵磷脂的研究较多，蛋黄来源的卵磷脂近年来才由于其含量高、氧化稳定性较好而逐渐引起人们的重视。蛋黄卵磷脂的检测方法主要有丙酮不溶物法，测磷法，紫外分光光度法，但都不能准确的检测出其主要功能成分磷脂酰胆碱的含量。[0003]高效液相色谱法是目前分离磷脂各组分，检测磷脂酰胆碱含量最为广泛研究和应用的方法，分为正相色谱法和反相色谱法。常用流动相主要有氯仿/甲醇/氨水、正己烷/异丙醇/水、乙腈/甲醇/水、乙腈/甲醇/磷酸等三元体系。但由于磷脂是一种脂类物质，由不同种类的脂肪酸以及双键结构构成，即使同是磷脂酰胆碱分子也包括不同的分子种类，在液相分析时常会出现峰的延展、拖尾现象，甚至会将磷脂酰胆碱组分分出好几个峰，给定量带来了困难。而且目前常用的流动相体系也比较复杂。流速大多为1ml/min。从磷脂酰胆碱标准曲线的线性范围来看，使用紫外检测器时其最...