整合考点21基因工程和细胞工程考纲要求考频(全国卷)1
基因工程的诞生Ⅰ5年0考2
基因工程的原理及技术(含PCR)Ⅱ5年7考3
基因工程的应用Ⅱ5年4考4
蛋白质工程Ⅰ5年1考5
植物的组织培养Ⅱ5年4考6
动物的细胞培养与体细胞克隆Ⅰ5年6考7
细胞融合与单克隆抗体Ⅱ5年5考8
动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论基础Ⅰ5年4考9
胚胎干细胞的移植Ⅰ5年3考10
胚胎工程的应用Ⅱ5年4考11
简述生态工程的原理Ⅱ5年1考12
生态工程的实例Ⅰ5年0考11.理清基因工程3种操作工具的作用与特点限制酶DNA连接酶载体作用切割目的基因和载体拼接DNA片段形成重组DNA分子携带目的基因进入受体细胞作用部位两核苷酸的脱氧核糖与磷酸间形成的磷酸二酯键作用特点(条件)(1)识别特定的核苷酸序列;(2)在特定位点上切割DNA分子(1)E·coliDNA连接酶只能连接黏性末端;(2)T4DNA连接酶能连接黏性末端和平末端(1)能在宿主细胞内稳定存在并大量复制;(2)有一个至多个限制酶切割位点;(3)具有特殊的标记基因2.掌握基因工程的操作步骤(1)目的基因的获取途径:方法具体操作直接分离从自然界已有的物种中分离,如从基因文库中获取人工合成化学合成已知核苷酸序列的较小基因,直接利用DNA合成仪用化学方法合成,不需要模板反转录法以RNA为模板,在逆转录酶作用下人工合成PCR技术扩增目的基因DNA受热变性后解链为单链,引物与单链相应互补序列结合,然后在DNA聚合酶作用下延伸(2)基因表达载体的构建——重组质粒的构建:①表达载体的组成:目的基因+启动子+终止子+标记基因+复制原点
②启动子和终止子:启动子是RNA聚合酶结合位点,启动转录;终止子是终止转录的位点
③基因表达载体的构建过程(3)将目的基因导入受体细胞:植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法显微注射技