第三节细胞融合技术1．举例说出细胞融合技术。2．简述单克隆抗体的制备过程。一、细胞融合技术1．杂交细胞当两个细胞紧密接触时，在适当条件下，其细胞膜可能融合在一起，产生具有原来两个细胞遗传信息的细胞，称为杂交细胞。2．细胞融合两个或两个以上的同种或异种细胞融合成一个细胞的过程，叫做细胞融合。（1）原理：膜的流动性。（2）过程：不同动物的两个体细胞杂交细胞。（3）诱导细胞融合的方法：聚乙二醇诱导、灭活的病毒诱导、电融合法等。二、细胞融合与单克隆抗体1．单克隆抗体源自一个B淋巴细胞的克隆所产生的抗体只会特异性地作用于一种抗原决定簇，我们将这种抗体称为单克隆抗体。2．单克隆抗体的制备过程（2）杂交瘤细胞的特点：既能在体外培养条件下快速生长和无限增殖，又能产生和分泌特异性抗体。（3）单克隆抗体的特点：理化性质单一、与抗原结合的特异性强。思考治疗癌症时，能否让治疗癌症的药物只杀死癌细胞，而不损伤正常细胞？提示：把抗癌细胞的单克隆抗体与药物相结合，制成“生物导弹”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。三、细胞融合与作物育种1．植物体细胞杂交植物体细胞杂交是指将两个来自不同种植物的体细胞在一定条件下融合成一个杂交细胞，并且把杂交细胞培养成新的植物体的方法。2．获得原生质体的常用方法——酶解法在温和的条件下用纤维素酶、果胶酶等分解植物细胞的细胞壁。3．诱导原生质体融合原生质体融合包括细胞膜融合→细胞质融合→细胞核融合。4．细胞融合技术的意义细胞融合技术可以避免受精过程，在亲缘关系较远的物种间实现基因转移，创造出自然界没有的新物种。1．植物体细胞杂交技术的原理、过程及应用（1）原理：依据细胞融合的生物学原理，即细胞膜的流动性。（2）过程及分析。①原生质体在融合过程中可能出现多种融合方式，进而形成不同的杂交细胞，因此应进行筛选。②杂交细胞形成的标志是细胞壁的再生，此过程与高尔基体等细胞器有关。③植物体细胞杂交的结果是获得杂种植株，整个过程包括细胞融合和植物组织培养两个阶段。④杂种植物之所以具有两个亲本性状的根本原因在于其体内含有两个亲本的遗传物质。（3）应用：可突破生殖隔离，克服远缘杂交不亲和的障碍，实现不同物种间遗传物质的重组，从而获得异源多倍体。①杂种植株的染色体组数是用于杂交的两种植物细胞染色体组数之和。②获得的杂种植株是否可育，与杂种植株所含染色体组数有关。若为偶数倍染色体组数，理论上是可育的；若为奇数倍染色体组数，理论上是不可育的。若杂种植株是可育的则已形成新的物种。2．植物体细胞杂交和动物细胞融合的区别细胞融合原理细胞融合方法诱导手段用途植物体细胞杂交细胞膜的流动性除去细胞壁后诱导原生质体融合离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导避免受精过程，在亲缘关系较远的物种间实现基因转移，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性使细胞分散后，诱导细胞融合离心、电刺激、聚乙二醇、灭活的仙台病毒等诱导制备单克隆抗体等3．植物体细胞杂交与单克隆抗体的制备的比较植物体细胞杂交（培育马铃薯杂种植株）动物细胞融合（制备单克隆抗体）过程第一步原生质体的制备（酶解法）正常小鼠的免疫处理第二步原生质体的融合动物细胞的融合第三步杂交细胞的筛选和培养第四步杂种植株的鉴定（分析染色体有无丢失）杂交瘤细胞的筛选和培养提纯单克隆抗体原理细胞膜的流动性、细胞增殖细胞膜的流动性、细胞的全能性（理论基础）融合前的处理酶解法除去细胞壁。所用的酶是纤维素酶、果胶酶注射特定抗原法免疫处理正常小鼠促融方法①物理方法：电刺激、离心、振动等；②化学方法：用聚乙二醇（PEG）等诱导①物理方法：电剌激、离心、振动等；②化学方法：用聚乙二醇等诱导；③生物方法：用灭活的仙台病毒诱导①由于B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合方式有多种，因此第一次筛选的目的是选出杂交瘤细胞，淘汰掉未融合的或同种细胞融合的细胞。②由于从小鼠体内提取的B淋巴细胞可能有多种，因此第一次筛选出的杂交瘤细胞可能有多种，通过克隆化培养和抗体检测进行第二次筛选，以选出能...
