遗传学实验吴雪薇1211400592013-5-231实验五：果蝇的三点测交吴雪薇121140059一、实验目的1、验证连锁互换定律，掌握并进行连锁分析，学习绘制遗传学图的原理和方法。2、了解伴性遗传与非伴性遗传的区别，了解伴性基因在正、反交中的差异。二、实验原理三点测交把三个基因包括在同一次交配中，即用三杂合体abc/+++或ab+/++c跟三隐性个体abc/abc测交。进行这种试验，一次就等于三次“两点试验”，而且带有另外两个优点。一次三点测验得到的三个重组值是在同一基因型背景、同一环境条件下得到的，而三次“两点试验”就不一定这样。重组值既受基因型背景的影响，也受各种环境条件的影响，所以，只有从三点试验所得到的三个重组值才是严格地可以互相比较的。通过三点测交试验，可以得到三次两点试验所不能得到的资料，即双交换的资料。果蝇的白眼、小翅、卷刚毛为X-连锁基因，全部隐性于各自的野生型基因（红眼、长翅、直刚毛），把白眼、小翅、卷刚毛雌蝇（wmsn/wmsn）与野生型雄蝇交配（＋＋＋/Y），F1雌蝇全部为野生型，雄蝇则全部表现为三隐性突变型，让F1互交，在F2中，不管雌雄性别，除了出现双亲类型外，还会出现新的表型种类，这是由于F1雌蝇中两个染色体之间发生了互换的结果，根据基因在染色体线性排列的遗传理论，对F2进行分析即可知不同基因间的连锁距离。因为这三个基因位于性染色体上，所以这个试验也可用来作为伴性遗传试验。当基因位于X或Y染色体上时，一般不含相对的等位基因，产生伴性遗传，在正交和反交试验中产生不同的结果。三、实验材料野生型黑腹果蝇，白眼、小翅、卷刚毛三隐性果蝇。四、实验仪器解剖镜、毛笔、麻醉瓶、白瓷板、标签、吸水纸、培养瓶(4瓶/人)、乙醚、75%乙醇五、实验步骤1、选三隐性雌性处女蝇（wmsn/wmsn）和野生型雄蝇（＋＋＋/Y）5～6对置于新鲜培养瓶中作正交，同时选野生型雌性处女蝇（＋＋＋/＋＋＋）和三隐性雄蝇（wmsn/Y）同置于新鲜培养瓶中，作为反交，贴上标签，注明亲本类型，实验日期，组别及姓名。2、自始自终进行果蝇生活周期的察看。写出观察日记：记录看到的果蝇行为，各发育阶段的主要现象及经历的时间等。遗传学实验吴雪薇1211400592013-5-2323、一周后，在实验室倒去亲本果蝇，一定要倒干净，一只也不能留。（此时瓶壁上应有黑色蛹)4、二周后，F1蝇长出，实验室内观察F1雌蝇和F1雄蝇的各个性状，并观察正反交不同组合的结果如何。5、取5-6对F1果蝇放入新鲜培养瓶中，正交放两瓶，反交一瓶。6、三周后，倒去F1，必须倒干净，一只也不能留。7、四周后，F2成蝇长出，统计各类果蝇数，2～3天后再统计一次（要求统计数量1000只以上），统计过的果蝇处死。应该统计的F2果蝇是正交中F2，但如果其数目不多，可借用反交中F2的雄蝇加以统计。8、记录实验数据。六、实验结果注：（1）F2统计数据由正交的数据与反交的雄蝇统计数据两者相加获得。（2）表中“-”代表没有交换，“+”代表发生了交换。F2果蝇表型类型（及基因型）数目重组区域w-snw-mm-sn白小卷（wmsn/wmsn,wmsn/y）164380---红长直（+++/wmsn,+++/y）216白小直（wm+/wmsn,wm+/y）813+-+红长卷（++sn/wmsn,+msn/y）5白长直（w++/wmsn,w++/y）6395++-红小卷（+msn/wmsn,+msn/y）32白长卷（w+sn/wmsn,w+sn/y）53147-++红小直（+m+/wmsn,+m+/y）94总计635108242160重组值17.01%38.11%25.20%双交换律2.05%遗传学实验吴雪薇1211400592013-5-233数据分析：1、重组率计算：108RF(w-sn)=—————=17.01%635242RF(w-m)=——————=38.11%635160RF(m-sn)=—————=25.20%6352、由表型的数据比较可看出，白小直与红长卷为双交换表型，因此可以得出三个基因在染色体上的顺序为：控制直刚毛与卷刚毛的sn在中间w–sn-m或者m–sn–w注：以上两种结果在本实验的结果表示中无差别，因此后面就用第一种表示方法表示。13双交换率=————=2.05%6353、表格中w与m间的重组率的计算没有将双交换的值计算在内，实际上它们之间在双交换时发生了两次交换，因此对其重组率的计算校正：RF(w-m)=38.11%+2.05%*2=42.21%4、由以上数据绘制染色体图wsnm17.0125.2042.215、计算并发系数与干涉2.05%...
