为什么工业发酵培养基灭菌采用湿热灭菌法
湿热灭菌:湿热灭菌是直接用蒸汽灭菌
为什么工业发酵培养基灭菌采用湿热灭菌法:蒸汽冷凝时释放大量潜热,并具有强大的穿透力,在高温和水存在时,微生物细胞中的蛋白质极易发生不可逆的凝固性变性,致使微生物在短时间内死亡
由于湿热灭菌有经济和快速等特点,因此被广泛用于工业生产
实罐灭菌的优缺点
实罐灭菌的四个阶段
实罐灭菌操作过程的关键
实罐灭菌的质量评判标准
空罐灭菌:当培养基(或物料)尚未进罐前对罐进行预先灭菌,我们称为空罐灭菌实罐灭菌:将培养基配制在发酵罐中,用饱和蒸汽将培养基加热,以达到预定灭菌温度并保温维持一段时间,然后再冷却到发酵温度,这种灭菌过程称作培养基实罐灭菌或称培养基分批灭菌(工厂里称实消)
实罐灭菌的优缺点:优点:1设备投资少(利用发酵罐将罐和培养基一同进行加热灭菌,无需另备灭菌设备);2灭菌后再次染菌的危险性较小;3适宜易发泡、黏度大和含固形物较多的培养基
缺点:1间歇操作,加热和冷却时间长,发酵周期长,发酵2罐的周转率低,不能适应大规模连续生产的要求;3无法采用高温短时间灭菌,培养基营养成分被破坏
实罐灭菌的四个阶段:Ⅰ—间接加热阶段,培养基由室温加热至80-90℃;Ⅱ—直接加热阶段,培养基由80-90℃121℃;Ⅲ—保温阶段,121℃Ⅳ—冷却阶段,121℃培养温度理论灭菌时间(指在特定温度下的灭菌时间):SSNNkNNk00lg1303
2ln1实罐灭菌操作过程的关键:发酵罐及附属阀门无泄漏、无死角、无堵塞灭菌时罐内蛇管和夹层冷却部位的冷却水彻底排除干净液面以下与培养基接触的管道都要进蒸汽液面以上不与培养基接触的管道都要排汽实罐灭菌的质量评判标准:a
达到无菌要求;b
营养成分破坏少;c
灭菌后培养体积与计料体积相符;d
在实罐灭菌结束时,为何应立即向罐内通入无菌空