菌种的分离与培养VIP免费

菌种的分离与培养在自然界里，食用菌都不是单独存在的，而是和许多细菌放射菌、霉菌等生活在一起的。所谓菌种分离，就是把这些和食用菌一起生活的杂菌分离出来，通过培养，获得纯的优良菌种。菌种分母种、原种、栽培种。一)母种的分离培养食用菌母种的分离，可分为抱子分离法、组织分离法以及基内菌丝分离等。抱子分离法抱子分离法，是用食用菌的有性抱子或无性抱子萌发成菌丝，培养成菌种的方法。这种菌种生活力较强，但孢子个体之间有差异，且自然分化现象较严重，变异大，需经出菇试验才能在生产上应用。()单抱分离法：是每次或每支试管只取一个担抱子，让它萌发成菌丝体来获得纯菌种的方法。蘑菇和草菇用单抱分离得到的菌丝，有结实能力，可采用此法分离生产纯菌种。单抱分离生产上较少采用，而且技术复杂，一般采用多抱分离法。()多抱分离法：就是把许多抱子接种在同一培养基上，让它们萌发、自由交配来获得食用菌纯菌种的一种方法。具体操作方法，有以下几种：静220小时，菌褶上的抱子就会散落在培养皿内。形①种菇抱子弹射法：选择个体健壮、朵形圆正，无病虫害、出菇均匀、高产稳产，适应性强的八九分成熟的种菇，切去大部分，菌柄用无菌水冲洗数遍后再用已灭菌的纱布或脱脂棉、滤纸吸干表面水分。在接种箱或无菌室内，把种菇的菌褶朝下用铁丝倒挂在玻璃漏斗下面，漏斗倒盖在培养皿上面；上端小孔用棉花塞住。培养皿放在一个铺有纱布的搪瓷盘上，成一层粉末状抱子印（平菇极淡紫色，蘑菇、草菇为褐色，香菇、金针菇抱子印白色）。用接种针沾取少量抱子在试管中的琼脂外面或培养皿上划线接种。待抱子萌发，生成菌落时，选抱子萌发早、长势好的菌落进行试管培养。还可用抱子采集器收集抱子。方法是选好种菇后，按上述程序，轻轻掀开玻璃钟罩，将种菇柄朝下插在抱子采收器的钢丝架上，放在培养皿正中央。随即盖好玻璃罩，用纱布将钟掌周围塞好。并在纱布上倒少许升汞或无菌水。移入209左右恒温箱培养。②褶上涂抹法：按无菌操作分离时；应选择成熟的种菇，用接种针直接插入褶片之间，轻轻抹取褶片表面子实体尚未弹射的抱子，再在培养基上划线接种。③钩悬法：取成熟菌盖的几片菌褶或一小块耳片（黑木耳、毛木耳、白木耳〕，用无菌不锈钢丝（或铁丝、棉线等其他悬挂材料）悬挂于三角瓶内的培养基的上方，勿使接触到培养基或四周瓶壁。置适宜温度下培养、转接即可。④贴附法：按无菌操作将成熟的菌褶或耳片取一小块，用溶化的琼脂培养基或阿拉伯胶、浆糊等贴附在配管斜面培养基正上方的试管壁上。经~2小时的培养，待抱子落在斜面上，立即把孢子连同部分琼脂培养基移植到新的试管中培养即可。抱子分离得到的母种、必须进一步提纯复壮，当母种定植一星期左右，菌丝布满斜面时，选择菌丝健壮、生长旺盛无老化、无感染杂茵的母种试管，进而转管扩大，一般到栽培种，转管不宜超过5次。抱子分离得到的母种，必须通过岀菇试验，鉴定为优质菌种后，才可供生产使用。一般菌类如蘑菇、平菇、凤尾菇、香菇、冬菇和草菇等，都可用多抱分离法获得母种。现就银耳抱子分离略述于下：按无菌操作获取种耳后，悬挂种耳的三角瓶经2小时培养后，瓶底培养基表面就有抱子印。取岀种耳，置209—259温箱培养2~天，培养基表面会岀现乳白色透明的糊状小菌落，就是银耳的酵母状分生抱子形成的少量银耳菌丝。此时移接入试管斜面培养基上，待长满斜面后，再移接入营养丰富，且表面比较干燥的培养基上。经0天左右，菌落长岀白色菌丝。银耳的酵母状分生孢子、菌丝只有与羽毛状菌丝的子囊菌（香灰菌丝）混合培养时，由后者帮助分解木材及其他一些纤维物质，提供营养，才能利于银耳孢子萌发，菌丝的定植和子实体的形成。在两种菌丝交会时，先选岀两种纯菌丝。羽毛状菌丝要纯化选育，一般要选取生长迅速，爬壁力强的试管斜面或种瓶，取先端菌丝，转管移接，置25C—28C上培养，重复转管几次即可得到优良纯种。银耳菌丝的特点，菌丝生长缓慢，担抱子也不易萌发。在进行两菌混合时，先取经8~天培养的银耳菌丝斜面，按无菌操作方法在该斜面上距银耳菌丝约厘米处接入一小块羽毛状菌丝。置25°C下培养周即得到混合好的银...