湖北省浠水县洗马高级中学高中生物《1.2 基因工程的基本操作程序》导学案 新人教版选修3VIP专享VIP免费

专题一基因工程1.2基因工程的基本操作程序【学习目标】1．理解基因工程的原理2．简述基因工程基本步骤的几个步骤【学习重点】基因工程的基本操作步骤【基础回扣】1、转录：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________酶：原则：结果：_______________________2、翻译：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________酶：原则：结果：_______________________氨基酸有_________种，决定氨基酸的密码子共有_________种，一种tRNA只能携带___种氨基酸,一种氨基酸可以由______种tRNA携带。mRNA……U－U－A－G－A－U－A－C－U……这mRNA上有密码子________个，与其相应的反密码子为_______________________________________。3、DNA复制：场所：_________________模板：_________________原料：_______________________酶：原则：结果：_______________________4、默写出中心法则：【预习导学】一、目的基因的获取1、目的基因：符合人们需要的，编码蛋白质的。2、获取目的基因的方法（1）从基因文库中获取目的基因①基因文库：将含有某种生物不同基因的许多_________，导入受体菌的群体中______，各个受体菌分别含有这种生物的不同基因，称为基因文库。基因组文库：含有一种生物的_______基因②种类cDNA文库：含有一种生物的____基因（cDNA是反转录获得的双链DNA）③目的基因的获取根据基因的有关信息：基因的___________序列、基因在___________上的位置、基因的_________产物mRNA、基因的_________产物蛋白质等特性获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因。①PCR：是一项在生物体外________特定DNA片段的核酸合成技术。②条件：已知目的基因的_____________序列。③过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链为；第二步：冷却到55～60℃，与两条单链DNA结合；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始进行的合成。④方式：指数扩增=2n(n为扩增循环的次数)（3）人工合成法：基因较小，核苷酸序列已知，可以人工合成。二、基因表达载体的构建1、表达载体的组成：目的基因+____________+____________+标记基因等。2．启动子：位于基因的________，它是RNA聚合酶_________和结合的部位，驱动基因转录产生mRNA。3、终止子：位于基因的尾瑞，终止___________。4、表达载体的功能：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且__________给下一代；使目的基因______________和发挥作用。5、标记基因：________受体细胞是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞出来。6、不同的受体细胞及目的基因导入受体细胞的方法不同，基因表达载体的构建上也会有所差别。构建方法：同种限制酶分别切割和，再用把两者连接。1三、将目的基因导入受体细胞：（一）转化：目的基因进人受体细胞内，并在受体细胞内维持稳定和_________的过程。（二）方法1、将目的基因导入植物细胞（1）农杆菌转化法①农杆菌特点：易感染________植物和裸子植物，对_________植物没有感染力；Ti质粒的_________可转移至受体细胞，并整合到受体细胞的染色体上。②转化：目的基因插入Ti质粒的____________农杆菌→导入植物细胞→目的基因整合到植物细胞染色体上→目的基因的遗传特性得以稳定维持和表达。（2）基因枪法基因枪法：是_______植物中常用的一种基因转化方法，但是成本较高。（3）花粉管通道法花粉管通道法：这是我国科学家独创的一种方法，是一种十分简便经济的方法。（我国的________________就是用此获得的）2、将目的基因导入动物细胞（1）方法：________注射技术。（2）操作程序：目的基因表达载体________→取卵(受精卵)→显微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性动物的________________内发育→新性状动物。3、将目的基因导人微生物细胞：Ca2＋处理法。首先将细胞用处理，成为。接下来将重组表达载体DNA分子与受体细胞在中混合，促进感受态细胞完成转化过程。（三）受体细胞：1、植物细胞作受体细胞时，可以选用体细胞和细胞，当选择体细胞作受体细胞时，可以通过方式实现细胞的全能性。2、动物细胞作受体细胞时，只能选择细胞。3...