第二节制备和应用固定化酶(时间：30分钟满分：50分)考查知识点及角度难度及题号基础中档稍难固定化酶的制备及应用56固定化细胞技术的应用1、2、3、4、57、8一、选择题(共5小题，每小题4分，共20分)1．下列关于固定化细胞技术的说法中，正确的是()。A．物理吸附法的优点是操作简单，吸附牢固B．包埋法的优点是操作复杂，条件温和，对细胞无毒性C．物理吸附法容易对酶活性产生影响D．凝胶包埋常用的凝胶种类有琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等解析固定化细胞的主要方法有物理吸附法和包埋法。它们各有利弊，物理吸附法的主要优点是酶活性不受影响，但吸附过程相当复杂，这一过程与微生物细胞的性质、载体的性质以及两者之间的相互作用等有关，且吸附力较弱吸附不牢固，细胞容易脱落。而包埋法操作简便，条件温和，对细胞无毒性，适合于生长细胞的固定化。凝胶包埋法常用的凝胶种类有琼脂糖、海藻酸钠、醋酸纤维素、明胶和聚丙烯酰胺等。答案D2．—在制备固定化酵母细胞的实验中，加入硼酸氯化钙溶液的作用是()。A．调节溶液pHB．进行离子交换C．胶体聚沉D．为酵母菌提供钙离子解析海藻酸钠胶体在CaCl2这种电解质溶液的作用下发生聚沉，形成凝胶珠，其作用机理是无机盐离子的电荷与胶体微粒电荷相互吸引，形成更大的胶体颗粒，类似于人体红细胞与凝集素之间的凝集反应。在制备固定化酵母细胞的过程中，制备CaCl2溶液用的是无水CaCl2。答案C3．下面制备固定化酵母菌细胞的正确步骤是()。①—配制饱和硼酸氯化钙溶液②制备海藻酸钠溶液③海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合④酵母菌细胞活化⑤固定化酵母菌细胞A．①②③④⑤B．④①③②⑤C．④⑤②①③D．④①②③⑤解析制备固定化酵母细胞应先加入蒸馏水进行酵母细胞活化，然后配制饱和硼酸-氯化钙溶液，再制备海藻酸钠—酵母细胞胶液，并将其以恒定的速度滴入预先盛有50mL饱和硼酸—氯化钙溶液的烧杯中，同时搅拌令凝胶珠形成。答案D4．固定化细胞常用包埋法固定，原因是()。A．包埋法固定操作最简便B．包埋法对酶活性的影响最小C．包埋法固定具有普遍性D．细胞体积大，难以被吸附或结合解析因为细胞个体大，而酶分子很小，个体大的细胞难以被吸附或结合，而个体小的酶容易从包埋材料中漏出。答案D5．下列有关固定化酶和固定化细胞的说法正确的是()。A．某种固定化酶的优势在于能催化系列生化反应B．固定化细胞技术一次只能固定一种酶C．固定化酶和固定化细胞的共同点是所固定的酶都可在细胞外起作用D．固定化酶和固定化细胞都能反复使用，但酶的活性迅速下降解析酶具有专一性，一种酶固定后也不可能催化系列生化反应；固定化细胞技术固定的是一系列酶；固定化酶和固定化细胞都能反复使用，若条件适宜，一般不会出现酶的活性下降问题。答案C二、非选择题(共30分)6．(13分)右图为固定化酶的反应柱示意图，其中①为反应柱，②为固定化酶，③为分布着小孔的筛板，请据图回答下面的问题。(1)下列关于固定化酶中用到的反应柱理解正确的是()。A．反应物和酶均可自由通过反应柱B．反应物和酶均不能通过反应柱C．反应物能通过，酶不能通过D．反应物不能通过，酶能通过(2)与一般酶制剂相比，固定化酶的突出优点是________，固定化细胞的优点是_______________________________________________________________。(3)③的作用是____________________________________________________。(4)制作固定化葡萄糖异构酶所用的方式有____________或________。(5)据图说出反应柱的作用原理：______________________________________________________________________________________________________。解析与一般的酶制剂相比，固定化酶不仅能与反应物充分接触，还能与产物分离，并且可以反复利用。但是与固定化细胞相比，固定化酶不能催化一系列的化学反应，并且固定化细胞成本更低，操作更容易。使用固定化酶技术往往利用一个反应柱，反应柱下端有一个分布着小孔的筛板，酶颗粒无法通过筛板，而反应物溶液却可以自由出入。答案(1)C(2)既能与反应物接触，又能与产物分离，能被反复利用成本更低，操作更容易(3)酶颗粒无法通过③，反应物溶液...
