3真核生物RNA的合成与加工mRNA的加工修饰涉及:5’端形成帽子构造、3’端加polyA、剪接除去内含子和甲基化
①5’-端加帽成熟的真核生物mRNA的5’-端有m7GPPPN构造,称为甲基鸟苷帽子
它是在RNA三磷酸酶,mRNA鸟苷酰转移酶,mRNA(鸟嘌呤-7)甲基转移酶和mRNA(核苷-2’)甲基转移酶催化形成的
不同的甲基化可形成3种帽子类型:0、1和2
鸟苷以5’-5’三磷酸键与RNA的5’-端相连
当G第7位C被甲基化形成m7GPPPN时,此构造称为“帽子0”
存在于单细胞生物
如果RNA的第1位核苷酸的2’-O位也甲基化,形成m7GPPPNm,称为“帽子1”,普遍存在;如果RNA的第1、2位核苷酸的2’-O位均甲基化(2位必需是A),成为m7G-PPPNmNm,称为“帽子2”,此构造发生极少
真核生物帽子构造的复杂程度与生物进化程度关系亲密
5’帽子的功效mRNA5’-端帽子构造是翻译起始所必要的,为核糖体识别mRNA提供了信号,并协助核糖体与mRNA结合使翻译从AUG开始
帽子构造可增加mRNA的稳定性,保护mRNA免遭5’→3’核酸外切酶的攻击
②在3’-端加尾巴大多数真核mRNA在3’-端都有约150~200nt的Poly(A)尾巴
Poly(A)尾是转录后在核内加上的
根据Poly(A)尾巴的特点可从众多的RNA中分离mRNA
真核基因的3’端有AATAA、YGTGTGYY(Y为嘧啶)序列,作为mRNA3’-端加polyA尾的信号
hnRNA链被RNaseⅢ在加尾巴信号下游11~30nt处切断磷酸二酯键,polyA聚合酶催化在3’-OH上逐个引入100~250个A
Poly(A)尾巴的功效避免核酸外切酶对mRNA信息序列的降解,起缓冲作用
可能与mRNA从细胞核转送到细胞质有关
但是相称数量的没有polyA尾巴的mRNA如组蛋白mRNA,也能通过