第二章 细胞生物学研究方法(the research method in the cell biology)教学目的1、了解主要工具和常用方法,侧重掌握基本原理和基本应用;2、认识工具和方法与学科发展的相关性。教学内容本章从以下 5 个方面介绍了细胞生物学的研究方法:1.显微成像技术2.细胞化学技术3.细胞分选技术4.细胞工程技术5.分离技术6.分子生物学方法计划学时及安排本章计划 3 学时。教学重点和难点生命科学是实验科学,它的很多成果都是通过实验才得以发现和发展的。许多细胞生物学的重要进展以及新概念的形成,往往来自新技术的应用。因此,方法上的突破,对于理论和应用上的发展具有巨大的推动作用,这是学习本章应确立的基本思想。1.显微成像包括直接成像和间接成像。显微技术是细胞生物学最基本的研究技术, 包括光学显微技术和电子显微技术。在光学显微技术中要掌握几种常用显微镜成像的基本原理,包括普通双筒显微镜、荧光显微镜、相差显微镜、暗视野显微镜、倒置显微镜。电子显微镜是研究亚显微结构的主要工具, 透射和扫描电镜的是两类主要的电子显微镜, 对其基本结构、工作原理和样品制备方法则是学习的重点。2.细胞化学技术介绍了酶细胞化学技术、免疫细胞化学技术、细胞分选技术 , 其中流式细胞分选技术是细胞生物学和现代生物技术中的重要技术, 应重点掌握。3.细胞工程技术是细胞生物学与遗传学的交叉领域,主要利用细胞生物学的原理和方法,结合工程学的技术手段,按照人们预先的设计,有计划地改变或创造细胞遗传性的技术。包括体外大量培养和繁殖细胞,或获得细胞产品、或利用细胞体本身。主要内容包括:细胞融合、细胞生物反应器、染色体转移、细胞器移植、基因转移、细胞及组织培养。 4.分离技术是一大类技术的总称,包括细胞组分的分离和生物大分子的分离 , 应掌握各种分离技术的原理和用途。利用样品对光的吸收形成明暗反差和颜色变化利用样品对电子的散射和透射形成明暗反差要求真空不要求真空要求真空1.33x10-5 ~1.33x10-3Pa玻璃透镜玻璃透镜电磁透镜可见光( 400-700 ) 紫外光(约 200nm)电子束( 0.01-0.9 )200nm100nmLMFMEM成像原理真空透镜光源分辨本领显微镜本章对分子生物学方法作了简要介绍, 为今后的学习奠定基础。简言之,本章教学重点是仪器方法的基本原理和基本应用;教学难点是电镜制样及分子杂交技术。教学方法 讲授、参观教学过程2.1 显微成像技术2.1.1、光学和电子显微镜成像原理共同点:照明...